【摘 要】
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参照GenBank上登录的猪胸膜肺炎放线杆菌血清5型菌株(AF363361)的apxⅠA基因序列设计了1对特异性引物,用PCR法扩增apxⅠA基因,获得了3 069 bp的片段,将其克隆到pMD 18-T载体,
【机 构】
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甘肃农业大学,甘肃农业大学,中国农业科学院
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参照GenBank上登录的猪胸膜肺炎放线杆菌血清5型菌株(AF363361)的apxⅠA基因序列设计了1对特异性引物,用PCR法扩增apxⅠA基因,获得了3 069 bp的片段,将其克隆到pMD 18-T载体,经酶切、PCR鉴定和序列分析,表明克隆是成功的.再将长为1 149 bp的apxⅠA基因的部分片段(编码ApxⅠ的N-端的片段)插入到原核表达载体pET-28(a)中,构建了重组表达质粒pET-apxⅠA,转化大肠埃希氏菌JM109(DE3),在IPTG诱导下获得了高效表达,经SDS-PAGE检测,
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