冬虫夏草对小鼠黑素瘤细胞肺转移的影响

来源 :国际中医中药杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoshen1984
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以小鼠黑素瘤细胞肺转移模型,探讨了冬虫夏草热水提取物(HW)的抑制作用。 材料及方法:①材料:培养的冬虫夏草( Cordyceps sinensis )菌丝体粉末以90-95℃热水提取3h,过滤、减压浓缩至约1/3量,再以90-95℃杀菌30min,-38℃冷冻干燥得提取物。②实验动物:6周龄C57BL/6雌性小鼠,在恒温恒湿环境下预饲养1周后用于试验。③实验性肺转移抑制试验:将小鼠分成4组,其中3组连续28d口饲溶解于蒸馏水的HWE(分别为100、250、750mg/kg),对照组口饲蒸馏水。肿瘤细胞使用B16-F10黑素瘤细胞株。实验开始后第15日经小鼠尾静脉注射细胞悬液(1×10^5细胞,只),第29日解剖取肺,固定后计数肺表面转移结节数。④自发性肺转移抑制试验:肺高转移性B16-BL6黑素瘤细胞用PBS配制成1×10^7细胞/ml,每只小鼠足跖部皮下注射50μl(5×10^5细胞)。移植后第15日,将小鼠分成4组,其中3组分别连日口饲上述浓度的HWE,对照组口饲蒸馏水。给药后第8日,确认肿瘤生长直径约为1cm后,乙醚麻醉将小鼠右后肢从根部切断,切断部位消毒、缝合。其后2周内继续分别口饲HWE及蒸馏水。移植后5周试验结束,解剖取肺计数肺表面转移结节数。⑤在NK活性抑制状态下,冬虫夏草对实验性肺转移的影响:受试组预饲HWE250mg/kg2周(对照组口饲蒸馏水),抗体给予组(包括口饲蒸馏水的对照组与HWE组)在试验开始后第13日尾静脉注射抗asialo GM1抗体0.3ml。翌日4组均经尾静脉注射B16-F10黑素瘤细胞悬液(1×10^5细胞/只)。继续给药2周,第29日解剖取肺,固定过夜,计数肺表面转移结节数。⑥在巨噬细胞活性抑制状态下,冬虫夏草对实验性肺转移的影响:HWE组小鼠预饲250mg/kg2周,第13日小鼠尾静脉注射2.氯腺苷10μl(2-氯腺苷50μg/只,分组及检测方法同⑤)。

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