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目的了解ELISA操作过程中温育和洗涤方式及显色条件对测定结果的影响。方法以HBsAg为例将样本应用样本分配仪加入微孔板,然后将通过不同的温育、洗涤方式、显色条件处理后检测样本的吸光度(A)值。结果全自动酶标仪和手工洗涤方式测定的HBsAg低值阳性标本有显著性差异(P<0.01);37℃干式温箱温育和37℃水浴结果没有明显差异;温育温度以37℃为佳,显色15-20min的结果最为稳定。结论全自动酶标仪一体化检测效果为佳;温育方式对实验无明显干扰;反应温度和显色时间应严格按操作规程执行以保证ELISA