【摘 要】
：
目的 建立可快速检测MTB rpoB基因516位点突变的探针导向重组酶介导等温扩增法(probedirected recombinase amplification,PDRA).方法 设计4条探针[1条野生型探针(P-W)及3条
【机 构】
：
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所中心实验室,北京,102206;中国疾病预防控制中心传染病预防控制所结核病室,北京,102206
论文部分内容阅读
目的 建立可快速检测MTB rpoB基因516位点突变的探针导向重组酶介导等温扩增法(probedirected recombinase amplification,PDRA).方法 设计4条探针[1条野生型探针(P-W)及3条突变型探针(P-GGC、P-GTC、P-TAC)]和1条共同的下游引物,分别构建TB-516-W、TB-516-GGC、TB-516-GTC和TB-516-TAC4种检测体系,在39℃条件下恒温扩增40 min.通过阳性阈值时间判定MTB rpoB基因516位点是否发生突变及其突变类型;通过同一探针检测对应的重组质粒确定该检测体系的敏感度;通过不同探针检测某一种重组质粒,根据阳性阈值时间确定该检测体系的特异度.应用建立的PDRA方法检测6株利福平耐药MTB菌株和35份MTB培养阳性的痰标本,并与一代测序结果进行比较.结果 4种检测体系检测对应重组质粒的敏感度为1000拷贝/μl.4种检测体系的特异度良好,探针与靶序列完全匹配时,阳性阈值时间早;探针与靶序列不完全匹配时,阳性阈值时间晚,具有稳定的阳性阈值时间差值,体系TB-516-W,TB-516-GGC,TB-516-GTC和TB-516-TAC的阳性阈值时间差值分别为7.0、5.8、10.0、7.0 min.PDRA检测6株MTB利福平耐药菌株和35份MTB培养阳性痰标本的结果与测序结果一致.结论 本研究初步建立了可应用于MTB利福平耐药rpoB基因516位点突变检测的PDRA方法,该方法检测敏感度高,特异度好,具有一定的实验室应用价值.
其他文献
不管你是否愿意,生活总会催促着你不停前行,我们整装、启程,奔走、到达;我们穿过一扇又一扇人生的大门,踏着一条条生命的大路,在周而复始的起点与终点里,我们迎着阳光,踏着清
近些年,事业单位当中出现一种情况,即工作人员流动性非常大,其中人事档案主要记录了人员的有关信息,目前社会建设越来越强大,此形势下,事业单位必须运用科学方法对档案进行管
近年来,我国经济飞速发展,给国内企业带来诸多机遇的同时,也带来了许多挑战.在激烈的市场竞争下,企业要想稳定的发展和进步,首先要做好会计管理工作,通过有效的会计管理来优
在高楼林立的中央商务区(简称CBD),楼宇经济是地区可持续发展的重要支撑,同时大量的商务楼宇也成了加强基层党建的新领域。朝阳区呼家
In the high-rise central business d
文章主要概述了全员绩效考核的内容,并分析企业在管理中开展这项工作存在的问题,最后讨论如何实现科学的全员绩效考核工作.
2015年12月至2017年12月,航空总医院普外科收治的320例肛周脓肿患者中5例患者术后30 d内切口未愈合,最终诊断为结核性肛周脓肿;其中3例并发肺结核,给予2R-H-E-Z/4R-H-E抗结核
水稻是重要的粮食作物,提高水稻的产量,是育种家和生物技术工作者共同的使命。分蘖是水稻生长的基本特性,是影响稻米产量的重要农艺性状之一。因此,对水稻分蘖的研究具有重要的理论意义和应用价值。随着遗传学和分子生物学实验方法的迅猛发展,一些参与分蘖的相关基因相继被克隆。为进一步阐明水稻分蘖复杂的分子机制提供了重要的理论依据从水稻保持系绵香1B(M1B)和一份雄性核不育材料(Genetic Male Ste
在新时代的发展背景下,经济发展迎来新的春天.我国各个企业在实体经济中占据重要地位,资金作为企业长久发展的决定性因素,是众多企业需要着重考虑的问题,尤其是中小型企业.中
彭凡,1963年生,宁夏共享集团有限责任公司董事长、总裁,中国铸造协会副理事长、高级工程师。他是获得2010年国家科学技术进步二等奖——“大型燃气轮机铸件研发及产业化”项
随着基本药物制度的不断推进,社区卫生服务中心药品管理的责任越来越大.本文就社区卫生服务中心药品管理的现状出发,从财务角度,分析药品管理面临的挑战,并提出了解决措施.