微小RNA簇miR-302s条件性基因打靶小鼠的制备和鉴定

来源 :实验动物与比较医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:maowangaa
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目的制备微小RNA簇miR-302s条件性基因打靶小鼠。方法构建miR-302s打靶载体,通过电穿孔的方法转染胚胎干细胞(ES细胞),用正负筛选法筛选阳性Es细胞并进行PCR鉴定和Southern分析。利用显微注射技术将正确同源重组的ES细胞注射至B6(Cg)-Tyr〈sup〉c.2J〈/sup〉/J小鼠囊胚腔内,注射后的囊胚植入受体小鼠子宫。将得到的嵌合体小鼠与野生型雌鼠交配获得miR-302s-LoxP基因打靶小鼠。结果获得嵌合体小鼠11只,其中4只嵌合雄鼠嵌合率〉50%。利用嵌合体小鼠进行繁育交配,
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