评价蛋白激酶Cα(PKCα)在电针减轻内毒素休克诱发兔急性肾损伤中的作用及其与核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1) 通路的关系。
方法健康清洁级雄性新西兰大白兔80只，2月龄，体重1.5～2.0 kg，采用随机数字表法分为8组(n＝10)：假手术组 (S组)、内毒素休克致急性肾损伤组(AKI组)、PKCα抑制剂-白屈菜赤碱＋AKI组(CHA组)、白屈菜赤碱组(Che组)、溶媒-二甲基亚砜组(D组)、电针刺激穴位＋AKI组(EA组)、电针刺激非穴位＋AKI组(SEA组)和电针刺激穴位＋白屈菜赤碱＋AKI组(CEA组)。EA组和CEA组于模型制备前1-4 d及模型制备过程中电针刺激双侧足三里和肾俞穴，疏密波，频率2/15 Hz，刺激电流1～2 mA，波宽0.2～0.6 ms，刺激强度以兔肢体出现轻微肌颤为宜，1次/d，30 min/次。SEA组以同样方法电针刺激足三里和肾俞穴旁开0.5 cm非经非穴处。AKI组、CHA组、EA组、SEA组和CEA组采用耳缘静脉注射脂多糖5 mg/kg的方法制备内毒素休克致急性肾损伤模型，S组、Che组和D组给予等容量生理盐水。于模型制备前30 min，CHA组和CEA组静脉注射白屈菜赤碱5 mg/kg (溶于0.5 ml 0.1%二甲基亚砜)，Che组给予等量白屈菜赤碱，D组给予二甲基亚砜0.5 ml。静脉注射脂多糖或生理盐水后6 h时，采集颈内动脉血样，检测血清BUN和Cr浓度，处死大鼠后取肾组织，行病理学观察并进行评分，测定肾组织MDA含量及SOD活性，检测肾组织PKCα、HO-1蛋白、核蛋白及总蛋白中Nrf2的表达水平。
结果与S组比较，AKI组、CHA组、EA组、SEA组和CEA组血清BUN和Cr浓度升高，肾组织MDA含量升高，SOD活性降低，肾组织病理学评分升高，PKCα、HO-1蛋白、核蛋白及总蛋白Nrf2的表达上调(P<0.05)；与AKI组比较，EA组血清BUN和Cr浓度降低，肾组织MDA含量降低，SOD活性升高，肾组织病理学评分降低，PKCα、HO-1蛋白、核蛋白及总蛋白Nrf2的表达上调，CHA组和CEA组血清BUN和Cr浓度升高，肾组织MDA含量升高，SOD活性降低，肾组织病理学评分升高，PKCα、HO-1蛋白、核蛋白及总蛋白Nrf2的表达下调(P<0.05)；与EA组比较，CEA组血清BUN和Cr浓度升高，肾组织MDA含量升高，SOD活性降低，肾组织病理学评分升高，PKCα、HO-1蛋白、核蛋白及总蛋白Nrf2的表达下调(P<0.05)；与CEA组比较，CHA组血清BUN和Cr浓度升高，肾组织MDA含量升高，SOD活性降低，肾组织病理学评分升高，PKCα、HO-1蛋白、核蛋白及总蛋白Nrf2的表达下调(P<0.05)。
结论PKCα介导电针足三里和肾俞穴减轻内毒素休克诱发兔急性肾损伤的作用，其机制可能与激活Nrf2/HO-1通路有关。