【摘 要】
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为表达兔视黄醇结合蛋白4（rRBP4）,提取兔肝脏组织总RNA,采用RT-PCR技术扩增了rRBP4的基因,大小为606bp。将其克隆于原核表达载体pET-32a（＋）获得表达重组质粒,并转化大肠埃希菌BL21
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物研究室
【基金项目】
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中央级公益性科研院所基本科研业务费专项（0302012008）
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为表达兔视黄醇结合蛋白4（rRBP4）,提取兔肝脏组织总RNA,采用RT-PCR技术扩增了rRBP4的基因,大小为606bp。将其克隆于原核表达载体pET-32a（＋）获得表达重组质粒,并转化大肠埃希菌BL21（DE3）Plyss中进行表达,pET-32a-rRBP4以包涵体形式表达,包涵体经过洗涤、变性后,用镍离子亲和层析柱纯化,并利用尿素梯度透析法复性。SDS-PAGE分析表明,获得与预期分子质量一致的特异性目的蛋白;Western blot检测表明,重组蛋白与小鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性反应
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