【摘 要】
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目的建立一套优化的激光捕获显微切割-单细胞聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)技术,应用于分子组织学研究中单细胞基因的检测。方法从淋巴结反应性增生冷冻组织
【机 构】
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遵义医药高等专科学校病理科; 遵义医学院附属肿瘤医院肿瘤科; 遵义市妇女儿童医院病理科; 济宁医学院附属金乡医院病理科;
【基金项目】
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贵州省优秀青年科技人才基金(2000371,200298);贵州省科学技术基金(2000-3-43)~~
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目的建立一套优化的激光捕获显微切割-单细胞聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)技术,应用于分子组织学研究中单细胞基因的检测。方法从淋巴结反应性增生冷冻组织切片中,应用激光捕获显微切割获取1~10个淋巴细胞,采用优化的单细胞PCR反应体系和条件进行β-珠蛋白基因检测。结果单轮常规PCR各组多细胞的扩增阳性率比较无显著性差异(P>0.05),而单细胞的扩增阳性率低于各组多细胞,有显著性差异(P<0.01);半巢式降落式PCR的单细胞扩增阳性率高于单轮常规PCR,有显著性差异(P<0.01)。结论联合应用优化的激光捕获显微切割及半巢式降落式PCR技术,显著提高了单细胞PCR的敏感性、特异性和稳定性。
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