骆驼β-防御素caBD-1 cDNA基因全序列RACE扩增方法的建立

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为获得骆驼β-防御素基因(caBD-1cDNA)的全长序列,采用锚定PCRRACE技术,根据已获得的骆驼伊防御素基因的部分已知序列,设计了1条特异性引物作为上游引物,将反转录引物中的部分序列即3’接合器引物作为下游引物,成功地克隆了caBD-1cDNA的3’末端序列;采用反向嵌套PCRRACE技术,根据已获得的骆驼β-防御素cDNA的部分序列,设计了1条5’末端磷酸化的特异性反转录引物和2对特异性反向嵌套PCR引物,首先进行反转录(RT),然后将mRNA反转录的cDNA进行环化,最后进行反向嵌套巢式PCR
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