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目的 体外构建含有SCN3A基因m RNA片段的质粒p CMV6-XL4-SCN3A的突变体N302S（c.905A〉G）,为进一步的功能研究奠定实验基础。方法 设计带突变位点的引物,以野生型质粒为模板进行定点诱变,构建突变质粒。质粒经扩增纯化后瞬时转染到HEK293细胞中,24 h后用RT-PCR方法验证目的基因的表达。结果重组质粒经酶切鉴定及测序证实突变成功。突变质粒转入HEK293细胞系24 h后,RT-PCR可以检测到目的基因的表达。结论 本实验成功地构建了SCN3A基因突变型真核表达载体p CM