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利用本实验室前期以ATP6为诱饵蛋白,通过酵母双杂交系统筛选到的一个N端含有RINGv结构(RING—variant)的蛋白,暂命名为BnRCH,构建GTK—BnRCH表达载体在原核细胞E.coliBL21(DE3)中高效表达GST—BnRCH融合蛋白,并将纯化的融合蛋白加入体外泛素反应体系,发现BnRCH在ATP、泛素、E1、E2存在的条件下,能催化多聚泛素化形成,具有E3连接酶活性.