【摘要】目的 探讨带状疱疹(HZ)患者T淋巴细胞亚群变化及其与Fas、Fasl表达的相关性。方法 选取2018年6月~2018年12月本院收治的HZ患者40例,采用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群及淋巴细胞Fas、Fasl表达水平,选取40例健康体检者作为对照组。结果 HZ患者外周血CD8+表达水平(31.11±5.72 %)显著高于对照组(26.38±4.71 %),CD4+、CD4+/CD8+表达水平(29.85±3.88%,0.96±0.51)显著低于对照组(35.62±5.58%,1.26±0.98),差异有统计学意义(P<0.05)。相比对照组,HZ患者外周CD4+T淋巴细胞Fas、Fasl表达水平显著降低,CD8+T淋巴细胞Fas、Fasl表达水平显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。HZ患者外周血CD8+表达与CD8+淋巴细胞上的Fas、Fasl表达均呈负相关(P<0.05),CD4+表达与CD4+淋巴细胞上的Fas、Fasl表达均呈负相关(P<0.05)。结论 HZ患者存在T淋巴细胞亚群异常改变,并且可能与Fas/Fasl介导的淋巴细胞凋亡功能紊乱有关。
【关键词】带状疱疹;T淋巴细胞亚群;Fas;Fasl
【中图分类号】R2-06【文献标识码】A 【文章编号】2026-5328(2021)10-006-03
带状疱疹(HZ)是由水痘-带状疱疹病毒(VZV)感染所致,多见于老年人及免疫功能低下者,其所致疼痛严重影响患者生活质量[1]。目前,HZ的治疗仍无特效手段,临床疗效不理想,主要原因在于其病理机制未得到完全阐明。研究发现[2],T淋巴细胞亚群异常与HZ的发病密切相关,在受到VZV感染时,HZ患者体内T淋巴细胞凋亡增多,使得由T淋巴细胞亚群介导的细胞免疫功能降低。Fas/FasL系统是体内介导细胞凋亡的一对糖蛋白分子,在机体免疫功能调节上有着重要作用,其表达异常被发现与多种免疫性疾病的发生发展具有关联性[3-4]。但目前关于带状疱疹患者Fas/Fasl表达水平的报道尚少见,尤其是其与T淋巴细胞亚群异常的相关性不明确。为此,本研究旨在观察带状疱疹患者T淋巴细胞亚群及Fas、Fasl的表达情况,并探讨二者的相关性。
1 对象与方法
1.1研究对象
选取2018年6月~2018年12月本院收治的HZ患者。纳入标准:(1)均经症状、体征诊断为HZ;(2)急性期,病程不超过7d;(3)未经相关治疗。排除标准:(1)合并严重心、肺等系统性疾病者;(2)合并自身免疫性疾病者;(3)伴严重中枢神经系统并发症;(4)恶性肿瘤患者;(5)其他急慢性感染者;(6)孕妇或哺乳期妇女;(7)合并其他可能影响免疫功能的疾病者。共入组40例,其中男18例,女22例,年龄37~66(52.73±6.83)岁,皮疹部位:头面6例,四肢13例,躯干21例。另选取同期性别、年龄相匹配的健康体检者40例作为对照组,其中男20例,女20例,年龄39~67(53.58±6.71)岁,均排除合并急慢性感染、自身免疫系统疾病等。两组性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。本研究获得本院伦理审批通过,受试者均签署知情同意书。
1.2研究方法
1.2.1标本采集
HZ组于就诊当天、未采取相关治疗措施之前,采集早晨空腹周静脉血5ml,用肝素钠抗凝,-80℃环境下保存待检。对照组于健康体检时采集标本。
1.2.2外周血T淋巴细胞亚群表达的检测
采用美国BD公司FACS Calibur流式细胞仪进行外周血T淋巴细胞的检测,检测方法参照文献[5]中方法。
1.2.3外周血淋巴细胞Fas、Fasl表达的检测
取2支EP试管A、B;A中加入CD4+、IgG-FITC各10uL;B中加入CD4+、Fas-FITC个10uL;加100uL悬液(细胞浓度为1×106/ml)于A、B中;室温下避光30min;用1ml PBS洗2次,离心1500r/min 5min;加1%多聚甲醛500uL上机分析 ,上机前先用标准荧光微球对流式细胞仪进行调试,以使各通道变异系数稳定在2%以内,记录CD4+淋巴细胞上Fas的表达情况;同法检测FasL及CD8+淋巴细胞Fas、Fasl表达情况。
1.3统计学方法
应用SPSS24.0进行统计分析。计数资料比较用x2检验计量资料(正态分布)采取()形式表示,用独立样本t检验进行组间对比;变量之间的相关性分析采用Pearson相关分析;以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 HZ患者外周血T淋巴细胞亚群表达
相比对照组,HZ患者外周血CD8+显著增高,CD4+及CD4+/CD8+显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。
2.2 HZ患者外周血淋巴细胞Fas、Fasl表达情况
相比对照组,HZ患者外周CD4+T淋巴细胞Fas、Fasl表达水平显著降低,CD8+T淋巴细胞Fas、Fasl表達水平显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。
2.3 HZ患者外周血T淋巴细胞亚群表达与Fas、Fasl表达的相关性
HZ患者外周血CD8+表达与CD8+淋巴细胞上的Fas、Fasl表达均呈负相关(P<0.05),CD4+表达与CD4+淋巴细胞上的Fas、Fasl表达均呈负相关(P<0.05)。见表3。
3 讨论
研究证实[6],HZ的发生发展与机体免疫功能低下紧密关联,而T细胞介导的细胞免疫在其中发挥着关键作用。在HZ病毒感染过程中,CD4+T细胞的耗竭可致使病毒载量增高。本研究显示,HZ组外周血CD8+表达显著增高,CD4+及CD4+/CD8+表达显著降低,差异有统计学意义,这与既往报道[7]一致,说明HZ患者存在细胞免疫功能低下,表现为CD8+表达增高,CD4+/CD8+比例增高。但带状疱疹患者的T淋巴细胞亚群的变化是通过何种机制实现的,目前尚不完全清晰。深入阐述HZ患者T淋巴细胞亚群失衡机制对于临床防治有着重要意义。