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目的
探讨高能X射线对人胚肺成纤维细胞(HFL-1)细胞胶原表达产生影响,并筛选胶原相关基因,为临床放射性肺纤维化的治疗提供理论依据。
方法将体外培养的HFL-1细胞随机分为对照组和放射组,放射组细胞予6 MV X射线5 Gy单次照射。照射后24 h以消化法检测两组细胞羟脯氨酸(HYP)表达情况,RT-PCR及蛋白印迹法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原基因及蛋白表达情况,采用基因芯片技术分析基因表达谱改变情况。
结果照射后24 h放射组细胞HYP表达显著高于对照组(1.834μg/ml∶4.912 μg/ml,P=0.000)。放射组照射后24 h Ⅰ、Ⅲ型胶原基因及蛋白表达均明显高于对照组(18.535∶186.779,P=0.000;4.337∶24.425,P=0.000)。两组细胞差异表达的基因为1879个,其中放射组上调基因771个、下调基因为1108个。参与纤维化的基因上调5倍以上的有TGF-β1、TGF-β3、MMP28、MMP26、MMP27和SMAD6。
结论高能X射线能诱导HFL-1细胞产生胶原,表达谱基因芯片技术可有效筛选高能X射线诱导胶原相关基因。放射性肺纤维化的发生发展由多个类型基因参与调控。