突变型聚酮合成酶酮还原酶域的表达及序列分析

来源 :化学与生物工程 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liucheng333

【摘要】

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为验证糖多孢红霉菌聚酮合成酶模块1的酮还原酶域EryKRl中的控制底物特异性位点，以糖多孢红霉菌基因组DNA为模板，用重叠PCR技术扩增出a6和a7之间的氨基酸残基RHGVIEMP对应的核

【作者】

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李凌凌吕早生李涛沈辉

【机构】

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武汉科技大学化学工程与技术学院

【出处】

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化学与生物工程

【发表日期】

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2011年8期

【关键词】

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酮还原酶域聚酮合成酶糖多孢红霉菌生物催化序列分析 ketoreductase domain polyketide synthase Saccharo

【基金项目】

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湖北省科技厅基金项目（2009CAD006）,武汉科技大学校基金资助项目（2006XYl4）

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为验证糖多孢红霉菌聚酮合成酶模块1的酮还原酶域EryKRl中的控制底物特异性位点，以糖多孢红霉菌基因组DNA为模板，用重叠PCR技术扩增出a6和a7之间的氨基酸残基RHGVIEMP对应的核苷酸序列被替换的EryKRl酶域DNA片段eryKRlM，并克隆到表达载体pET-28a上，构建了质粒pET-eryKRlM，转化到EscherichiacoliBL21（DE3）后，获得了重组菌株E．coliBL21（pETeryKRiM）。经IPTG诱导后，SDS-PAGE电泳分析表明重组大肠杆菌E．coliBL21

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