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摘要：过去的十年，肺癌的发病率和死亡率显著增加，严重威胁着人类健康。因缺乏敏感和有效的早期诊断指标以及发生转移和复发、化疗耐药等影响，肺癌患者总体5年生存率并不乐观。现在有研究发现，在肺癌的相关生物样本中能筛选验证出诸多差异表达的环状RNA，并且环状RNA在肺癌的发生发展过程中发挥着重要作用，有望作为肺癌早期诊断及预测治疗预后的一种新型生物标志物。环状RNA的筛选验证技术也在不断地被探索研究。本文结合最新的研究，对环状RNA与肺癌相关性及其筛选验证的研究进展做一综述。
关键词：环状RNA;肺癌;生物标志物;筛选验证
【中图分类号】R56;R737.9 【文献标识码】A 【文章编号】1673-9026（2020）10-174-02
据报道，在过去的十年里肺癌的发病率和死亡率呈显著增加，严重威胁着人类健康。肺癌中，非小细胞肺癌（NSCLC）是肺癌最常见的组织病理学亚型，包括大细胞肺癌（LCC）、肺鳞状细胞癌（LSCC）和肺腺癌（LAD）。如今NSCLC的治疗取得了很大进展，早期NSCLC经手术治疗后患者5年生存率可达70%-90% ，但因缺乏敏感和有效的早期诊断指标以及发生转移和复发、化疗耐药影响，约75%的患者在就诊时已是进展期或晚期，错过了最佳治疗时间，使得非小细胞肺癌患者的总体5年生存率很低，而小细胞肺癌（ SCLC）在肺癌中仅占约15%，但是SCLC更具侵袭性，超过90%的患者在诊断时已是晚期，患者5年生存率仅为5% [1]。为此，迫切需要寻找肺癌早期诊断和治疗的生物标志物，以供临床能实施早期并且准确的干预，让肺癌患者的预后得到有效地改善。
1肺癌中的环状RNA
1.1肺癌组织细胞的环状RNA
1.1.1非小细胞肺癌
差异表达的环状RNA作为一种竞争性内源性核糖核酸（ceRNA）在非小细胞肺癌（NSCLC）的发生和发展中起着重要作用。张韶岩等 [2]对NSCLC癌组织与癌旁组织的表达谱变化进行筛选后，发现差异表达的circRNA共有171种，高表达的circRNA有148种，低表达的有23种，其中高表达差异3倍以上的37种，低表达差异3倍以上的有2种。另外，经筛选验证在非小细胞肺癌的组织细胞中，CCIRC_ZKSKAN1[1]，hsa_circ_0014130[3]，circ_ABCB10[4]，circFOXM1[5]，circNT5E[6]，circAcAcA[7]，Circ_CMPK1[8]，circHIPK3[9]，Hsa_circ_0003998[10]表达上调，可促进非小细胞肺癌的进展。circ 0072309[11]，circ_0078767[12]表达上调，可阻断非小细胞肺癌的进展。circRNA circPIP5K1A[13]，Has_circ_0014130[14]，has_circ_0079530[14]，circ0003645[15]表达上调，与非小细胞肺癌的预后有关 。这些环状RNA都有望成为非小细胞肺癌有前途的生物标志物。
肺腺癌（LAD）约占所有肺癌亚型的40%，是全世界与癌症相关的死亡的最常见原因。LAD患者的平均生存率很低，为4%至17%[16]。现有研究表明，在肺腺癌组织细胞中，circ_CRIM1[17] 表达上调，会抑制肺腺癌细胞的迁移、侵袭、转移，hsa_circ_0000326[18]，Circ_ZNF609[19]，CDR1_AS[20]，CircCRIM1[21]，circ_CAMK2A[22]，circ0012673[23]，hsa_circ_0014130[24]表达上调，会影响肺腺癌细胞的增殖、迁移和凋亡，预后。这些环状RNA可以成为肺腺癌有前途的生物标志物。
肺鳞状细胞癌（LSCC）是非小细胞肺癌的主要亚型. 有研究证实，hsa_circ_0077837和hsa_circ_0001821可以作为LAD和LSCC的潜在生物标志物，而hsa_circ_0001495可能是LSCC的诊断生物标志物[25]。
1.1.2小细胞肺癌
与非小细胞肺癌相比，小细胞肺癌（SCLC）具有恶性度高、容易转移等特点。目前对小细胞肺癌相关环状RNA的研究较少见报道。最近Li 等研究表明，FLI1外显子circRNA（FECR）是SCLC的致癌因素，FECR1（外显子4-2-3）和FECR2（外显子5-2-3-4）在SCLC组织细胞中表达异常上调，并且与淋巴结呈正相关转移，FLI1该基因可能通过编码FLI1癌蛋白并产生FECRs在SCLC的发病过程中起双重作用，可用作追踪SCLC疾病进展的生物标志物[26]。
1.2肺癌血液外泌体的环状RNA
外泌体是一类纳米级的（30-150 nm）细胞外囊泡，能被大多数类型的细胞脱落并在体液（如血液，尿液，唾液和母乳）中循环，其内容物广泛，有各种生长因子、蛋白质、脂质、核酸、长的非编码RNA和环状RNA（circRNA）组成。外泌体作为细胞间的重要载体，可将蛋白质、核糖核酸和其他成分从细胞传递到细胞外空间，通过在细胞通讯中起重要信使作用，对疾病的病理生理过程起着重要影响。Li等[27]发现，环状RNA在血清外泌体中是稳定存在的，其形态仍然是完整的圆形环状，而且大部分circRNA的半衰期长于mRNA，大多数物种的circRNA半衰期超过了48 小时。也有研究表明，环状RNA在体液（包括血清外体、血浆和唾液）中更加丰富和稳定，在人唾液和外周血中，数百种环状RNA比同源线性mRNA表達更高，更容易检测。肺癌患者的血浆外泌体中也存在环状RNA差异表达，环状RNA有可能是非侵入性检查中较理想的生物标志物。 1.2.1非小细胞肺癌
经筛选验证发现，有一种由主要位于细胞质中的EML4-ALK融合基因产生的融合环状RNA（F-circEA），明确存在于EML4-ALK阳性非小细胞肺癌患者血浆中，F-circEA可能是非小细胞肺癌的新型液体活检生物标志物[28]。非小细胞肺癌患者血浆circFARSA 的含量也高于健康对照组，circFARSA 可能成为 NSCLC 的潜在生物标志物[29]。
此外，在研究肺腺癌患者血浆外泌体中的差异表达环状RNA（circRNA）时，Chen等[30]共筛选了182种差异表达的外泌体circRNA，与对照组相比，LAD患者血浆中有105个上调和78个下调，包括circ_0001492，circ_0001346，circ_0000690和circ_0001439在内的四个上调的circRNA与qRT-PCR的测序数据相同，揭示了LAD患者血浆样品中外体circRNA表达的改变，并支持了探索其作为生物标志物的潜力和肺癌的病理效应的需求。
Wang等[31]也提出，hsa_circ_0014235和hsa_circ_0025580可作为（LSCC）的新型诊断生物标志物，经临床研究后他们首次揭示了外泌体circRNA在肺鳞状细胞癌中的表达谱，并显示了circRNA在肺鳞状细胞癌中的重要诊断潜力。
1.2.2小细胞肺癌
有研究显示，与对照组相比，小细胞肺癌（SCLC）中的血清外体circRNA（FECR1）异常上调，血清外泌体FECR1表达水平伴随着小细胞肺癌的临床化疗改变，血清外体FECR1可以作为追踪SCLC疾病进展的有前途的生物标记[26] 。
2环状 RNA 的筛选验证
环状 RNA的筛选验证技术一直在被探索研究，但目前对环状RNA的研究仍然还存在困难，如环状 RNA因结构特殊没有游离的 3′和 5′端，无法用传统的分子生物学技术进行筛选验证;标本中环状RNA通常表达量较低，不便于检测。大量RNA测序数据显示，可在测序结果中寻找两个重排外显子之间的结点，来筛选可能存在的环状 RNA。随着科技发展也出现了许多商业化筛选技术，如高通量测序又名二代测序、基因芯片。其中高通量测序成本较高，但可以发现新的环状 RNA，而基因芯片成本相对较低，只能筛选已知的环状 RNA。
目前在实验室中主要有以下几种环状 RNA验证方法：（1） RT-PCR 定量法：针对环状 RNA 的反向剪接位点设计一对发散引物，使环状RNA按预期扩增，然后对扩增产物进行 Sanger 测序确认环状RNA。（2）探针杂交法：RNase H 是一个可以降解 RNA-DNA中RNA分子的核酸内切酶。当两个短的 DNA 探针杂交至目的RNA分子时，若该RNA分子为线性，则在 RNase H 消化后电泳出现三条带;若该RNA分子为环状，则为两条带，根据电泳条带即可验证环状RNA。（3）二维变性聚丙烯酰胺凝胶（2D-PAGE）电泳：根据环状RNA的迁移率比线性 RNA 分子要慢，在2D-PAGE中线性RNA沿对角线迁移而环状 RNA 则弧向迁移来鉴别验证。在实际研究中往往需结合以上多种方法来验证环状RNA。
另外，近年来发展起来的一些RNA检测技术也可以为环状RNA筛选验证的研究和未来发展提供新思路。如依赖核酸序列的扩增（NASBA）技术和CRISPR基因编辑技术。NASBA技术，是检测RNA的一种新型等温扩增技术，适用于很多RNA样品的分析。而基于CRISPR的联合检测工具可以整合常见分子诊断技术的优势，既有qPCR、数字PCR等其它分子诊断技术的卓越性能，也比其他等温扩增技术具有更好的灵敏度和特异性。
3 讨论与展望
近些年环状 RNA的研究掀起了肺癌研究领域的热点，已有研究证实，环状 RNA在肺癌中稳定异常表达，具有良好的灵敏度与特异性，与肺癌不良预后相关，为肺癌的早期诊断与预后标记物的开发提供了新希望。
但目前环状 RNA与肺癌相关性的研究还处于基础阶段，仍存在一些局限性：（1）大多数研究仅限于NSCLC，circRNA在SCLC患者中的价值研究较少。（2）大多数研究集中于肿瘤组织与正常邻近组织之间的差异表达比较，其他生物样本，如血清、血浆或痰液中circRNA的表达与诊断价值研究较少。（3）研究多数仅基于单中心、小样本的单个circRNA研究。需要针对多个circRNA构建肺癌相关的circRNA组（circRNA panel）进行研究才更具临床价值。不过随着生物学技术发展，相信circRNA的研究会出现广阔的应用前景，很有可能成为肺癌潜在的早期诊断、预测预后及治疗的标志物。同时随着环状RNA筛选验证技术的研究发展，环状RNA将为肺癌的精准治疗提供新策略。
参考文献
[1] Wang Y，Xu R，Zhang D，et al. Circ-ZKSCAN1 regulates FAM83A expression and inactivates MAPK signaling by targeting miR-330-5p to promote non-small cell lung cancer progression[J]. Translational Lung Cancer Research，2019，8（6）：862-75.
[2] 張韶岩，曾小莉，郭琳，等.非小细胞肺癌环状RNA表达谱的差异分析[J].中华肺部疾病杂志（电子版），2018，11（2）：144-149.
[3] Geng Y，Bao Y，Zhang W，et al. Circular RNA hsa_circ_0014130 Inhibits Apoptosis in Non-Small Cell Lung Cancer by Sponging miR-136-5p and Upregulating BCL2[J]. Mol Cancer Res. 2020，18（5）：748‐756. [4] Zheng J P，Dai Y M，Chen Z，et al. Circular RNA circ-ABCB10 promotes non-small cell lung cancer proliferation and inhibits cell apoptosis through repressing KISS1[J]. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2020，24（5）：2518‐2524.
[5] Yu C，Cheng Z，Cui S，et al. circFOXM1 promotes proliferation of non-small cell lung carcinoma cells by acting as a ceRNA to upregulate FAM83D[J]. J Exp Clin Cancer Res. 2020，39（1）：55.
[6] Dong L，Zheng J，Gao Y，et al. The circular RNA NT5E promotes non-small cell lung cancer cell growth via sponging microRNA-134[J]. Aging （Albany NY）. 2020，12（4）：3936‐3949.
[7] Wu W，Xi W，Li H，et al. Circular RNA circACACA regulates proliferation，migration and glycolysis in nonsmallcell lung carcinoma via miR1183 and PI3K/PKB pathway[J]. International journal of molecular medicine. 2020，45（6）：1814-24.
[8] Cui D，Qian R，Li Y. Circular RNA circ-CMPK1 contributes to cell proliferation of non-small cell lung cancer by elevating cyclin D1 via sponging miR-302e[J]. Mol Genet Genomic Med. 2020，8（2）：e999.
[9] Tian F，Wang Y，Xiao Z，et al. [Circular RNA CircHIPK3 Promotes NCI-H1299 and NCI-H2170 Cell Proliferation Through miR-379 and Its Target IGF1] [J]. Zhongguo fei ai za zhi = Chinese journal of lung cancer. 2017，20（7）：459-467.
[10] Li Y，Hu J，Li L，et al. Upregulated circular RNA circ_0016760 indicates unfavorable prognosis in NSCLC and promotes cell progression through miR-1287/GAGE1 axis[J]. Biochem Biophys Res Commun. 2018，503（3）：2089‐2094.
[11] Pang W，Huang F，Zhang X，et al. Circular RNA hsa_circ_0072309 inhibits non-small cell lung cancer progression by sponging miR-580-3p[J]. Biosci Rep. 2020，40（5）：BSR20194237.
[12] Chen T，Yang Z，Liu C，et al. Circ_0078767 suppresses non-small-cell lung cancer by protecting RASSF1A expression via sponging miR-330-3p[J]. Cell Prolif. 2019，52（2）：e12548.
[13] Chi Y，Luo Q，Song Y，et al. Circular RNA circPIP5K1A promotes non-small cell lung cancer proliferation and metastasis through miR-600/HIF-1α regulation[J]. J Cell Biochem. 2019;120（11）：19019‐19030.
[14] Zhang S，Zeng X，Ding T，et al. Microarray profile of circular RNAs identifies hsa_circ_0014130 as a new circular RNA biomarker in non-small cell lung cancer[J]. Sci Rep. 2018;8（1）：2878.
[15] An J，Shi H，Zhang N，et al. Elevation of circular RNA circ_0003645 forecasts unfavorable prognosis and facilitates cell progression via miR-1179/TMEM14A pathway in non-small cell lung cancer[J]. Biochem Biophys Res Commun. 2019，511（4）：921‐925.
关键词：环状RNA;肺癌;生物标志物;筛选验证
【中图分类号】R56;R737.9 【文献标识码】A 【文章编号】1673-9026（2020）10-174-02
据报道，在过去的十年里肺癌的发病率和死亡率呈显著增加，严重威胁着人类健康。肺癌中，非小细胞肺癌（NSCLC）是肺癌最常见的组织病理学亚型，包括大细胞肺癌（LCC）、肺鳞状细胞癌（LSCC）和肺腺癌（LAD）。如今NSCLC的治疗取得了很大进展，早期NSCLC经手术治疗后患者5年生存率可达70%-90% ，但因缺乏敏感和有效的早期诊断指标以及发生转移和复发、化疗耐药影响，约75%的患者在就诊时已是进展期或晚期，错过了最佳治疗时间，使得非小细胞肺癌患者的总体5年生存率很低，而小细胞肺癌（ SCLC）在肺癌中仅占约15%，但是SCLC更具侵袭性，超过90%的患者在诊断时已是晚期，患者5年生存率仅为5% [1]。为此，迫切需要寻找肺癌早期诊断和治疗的生物标志物，以供临床能实施早期并且准确的干预，让肺癌患者的预后得到有效地改善。
1肺癌中的环状RNA
1.1肺癌组织细胞的环状RNA
1.1.1非小细胞肺癌
差异表达的环状RNA作为一种竞争性内源性核糖核酸（ceRNA）在非小细胞肺癌（NSCLC）的发生和发展中起着重要作用。张韶岩等 [2]对NSCLC癌组织与癌旁组织的表达谱变化进行筛选后，发现差异表达的circRNA共有171种，高表达的circRNA有148种，低表达的有23种，其中高表达差异3倍以上的37种，低表达差异3倍以上的有2种。另外，经筛选验证在非小细胞肺癌的组织细胞中，CCIRC_ZKSKAN1[1]，hsa_circ_0014130[3]，circ_ABCB10[4]，circFOXM1[5]，circNT5E[6]，circAcAcA[7]，Circ_CMPK1[8]，circHIPK3[9]，Hsa_circ_0003998[10]表达上调，可促进非小细胞肺癌的进展。circ 0072309[11]，circ_0078767[12]表达上调，可阻断非小细胞肺癌的进展。circRNA circPIP5K1A[13]，Has_circ_0014130[14]，has_circ_0079530[14]，circ0003645[15]表达上调，与非小细胞肺癌的预后有关 。这些环状RNA都有望成为非小细胞肺癌有前途的生物标志物。
肺腺癌（LAD）约占所有肺癌亚型的40%，是全世界与癌症相关的死亡的最常见原因。LAD患者的平均生存率很低，为4%至17%[16]。现有研究表明，在肺腺癌组织细胞中，circ_CRIM1[17] 表达上调，会抑制肺腺癌细胞的迁移、侵袭、转移，hsa_circ_0000326[18]，Circ_ZNF609[19]，CDR1_AS[20]，CircCRIM1[21]，circ_CAMK2A[22]，circ0012673[23]，hsa_circ_0014130[24]表达上调，会影响肺腺癌细胞的增殖、迁移和凋亡，预后。这些环状RNA可以成为肺腺癌有前途的生物标志物。
肺鳞状细胞癌（LSCC）是非小细胞肺癌的主要亚型. 有研究证实，hsa_circ_0077837和hsa_circ_0001821可以作为LAD和LSCC的潜在生物标志物，而hsa_circ_0001495可能是LSCC的诊断生物标志物[25]。
1.1.2小细胞肺癌
与非小细胞肺癌相比，小细胞肺癌（SCLC）具有恶性度高、容易转移等特点。目前对小细胞肺癌相关环状RNA的研究较少见报道。最近Li 等研究表明，FLI1外显子circRNA（FECR）是SCLC的致癌因素，FECR1（外显子4-2-3）和FECR2（外显子5-2-3-4）在SCLC组织细胞中表达异常上调，并且与淋巴结呈正相关转移，FLI1该基因可能通过编码FLI1癌蛋白并产生FECRs在SCLC的发病过程中起双重作用，可用作追踪SCLC疾病进展的生物标志物[26]。
1.2肺癌血液外泌体的环状RNA
外泌体是一类纳米级的（30-150 nm）细胞外囊泡，能被大多数类型的细胞脱落并在体液（如血液，尿液，唾液和母乳）中循环，其内容物广泛，有各种生长因子、蛋白质、脂质、核酸、长的非编码RNA和环状RNA（circRNA）组成。外泌体作为细胞间的重要载体，可将蛋白质、核糖核酸和其他成分从细胞传递到细胞外空间，通过在细胞通讯中起重要信使作用，对疾病的病理生理过程起着重要影响。Li等[27]发现，环状RNA在血清外泌体中是稳定存在的，其形态仍然是完整的圆形环状，而且大部分circRNA的半衰期长于mRNA，大多数物种的circRNA半衰期超过了48 小时。也有研究表明，环状RNA在体液（包括血清外体、血浆和唾液）中更加丰富和稳定，在人唾液和外周血中，数百种环状RNA比同源线性mRNA表達更高，更容易检测。肺癌患者的血浆外泌体中也存在环状RNA差异表达，环状RNA有可能是非侵入性检查中较理想的生物标志物。 1.2.1非小细胞肺癌
经筛选验证发现，有一种由主要位于细胞质中的EML4-ALK融合基因产生的融合环状RNA（F-circEA），明确存在于EML4-ALK阳性非小细胞肺癌患者血浆中，F-circEA可能是非小细胞肺癌的新型液体活检生物标志物[28]。非小细胞肺癌患者血浆circFARSA 的含量也高于健康对照组，circFARSA 可能成为 NSCLC 的潜在生物标志物[29]。
此外，在研究肺腺癌患者血浆外泌体中的差异表达环状RNA（circRNA）时，Chen等[30]共筛选了182种差异表达的外泌体circRNA，与对照组相比，LAD患者血浆中有105个上调和78个下调，包括circ_0001492，circ_0001346，circ_0000690和circ_0001439在内的四个上调的circRNA与qRT-PCR的测序数据相同，揭示了LAD患者血浆样品中外体circRNA表达的改变，并支持了探索其作为生物标志物的潜力和肺癌的病理效应的需求。
Wang等[31]也提出，hsa_circ_0014235和hsa_circ_0025580可作为（LSCC）的新型诊断生物标志物，经临床研究后他们首次揭示了外泌体circRNA在肺鳞状细胞癌中的表达谱，并显示了circRNA在肺鳞状细胞癌中的重要诊断潜力。
1.2.2小细胞肺癌
有研究显示，与对照组相比，小细胞肺癌（SCLC）中的血清外体circRNA（FECR1）异常上调，血清外泌体FECR1表达水平伴随着小细胞肺癌的临床化疗改变，血清外体FECR1可以作为追踪SCLC疾病进展的有前途的生物标记[26] 。
2环状 RNA 的筛选验证
环状 RNA的筛选验证技术一直在被探索研究，但目前对环状RNA的研究仍然还存在困难，如环状 RNA因结构特殊没有游离的 3′和 5′端，无法用传统的分子生物学技术进行筛选验证;标本中环状RNA通常表达量较低，不便于检测。大量RNA测序数据显示，可在测序结果中寻找两个重排外显子之间的结点，来筛选可能存在的环状 RNA。随着科技发展也出现了许多商业化筛选技术，如高通量测序又名二代测序、基因芯片。其中高通量测序成本较高，但可以发现新的环状 RNA，而基因芯片成本相对较低，只能筛选已知的环状 RNA。
目前在实验室中主要有以下几种环状 RNA验证方法：（1） RT-PCR 定量法：针对环状 RNA 的反向剪接位点设计一对发散引物，使环状RNA按预期扩增，然后对扩增产物进行 Sanger 测序确认环状RNA。（2）探针杂交法：RNase H 是一个可以降解 RNA-DNA中RNA分子的核酸内切酶。当两个短的 DNA 探针杂交至目的RNA分子时，若该RNA分子为线性，则在 RNase H 消化后电泳出现三条带;若该RNA分子为环状，则为两条带，根据电泳条带即可验证环状RNA。（3）二维变性聚丙烯酰胺凝胶（2D-PAGE）电泳：根据环状RNA的迁移率比线性 RNA 分子要慢，在2D-PAGE中线性RNA沿对角线迁移而环状 RNA 则弧向迁移来鉴别验证。在实际研究中往往需结合以上多种方法来验证环状RNA。
另外，近年来发展起来的一些RNA检测技术也可以为环状RNA筛选验证的研究和未来发展提供新思路。如依赖核酸序列的扩增（NASBA）技术和CRISPR基因编辑技术。NASBA技术，是检测RNA的一种新型等温扩增技术，适用于很多RNA样品的分析。而基于CRISPR的联合检测工具可以整合常见分子诊断技术的优势，既有qPCR、数字PCR等其它分子诊断技术的卓越性能，也比其他等温扩增技术具有更好的灵敏度和特异性。
3 讨论与展望
近些年环状 RNA的研究掀起了肺癌研究领域的热点，已有研究证实，环状 RNA在肺癌中稳定异常表达，具有良好的灵敏度与特异性，与肺癌不良预后相关，为肺癌的早期诊断与预后标记物的开发提供了新希望。
但目前环状 RNA与肺癌相关性的研究还处于基础阶段，仍存在一些局限性：（1）大多数研究仅限于NSCLC，circRNA在SCLC患者中的价值研究较少。（2）大多数研究集中于肿瘤组织与正常邻近组织之间的差异表达比较，其他生物样本，如血清、血浆或痰液中circRNA的表达与诊断价值研究较少。（3）研究多数仅基于单中心、小样本的单个circRNA研究。需要针对多个circRNA构建肺癌相关的circRNA组（circRNA panel）进行研究才更具临床价值。不过随着生物学技术发展，相信circRNA的研究会出现广阔的应用前景，很有可能成为肺癌潜在的早期诊断、预测预后及治疗的标志物。同时随着环状RNA筛选验证技术的研究发展，环状RNA将为肺癌的精准治疗提供新策略。
参考文献
[1] Wang Y，Xu R，Zhang D，et al. Circ-ZKSCAN1 regulates FAM83A expression and inactivates MAPK signaling by targeting miR-330-5p to promote non-small cell lung cancer progression[J]. Translational Lung Cancer Research，2019，8（6）：862-75.
[2] 張韶岩，曾小莉，郭琳，等.非小细胞肺癌环状RNA表达谱的差异分析[J].中华肺部疾病杂志（电子版），2018，11（2）：144-149.
[3] Geng Y，Bao Y，Zhang W，et al. Circular RNA hsa_circ_0014130 Inhibits Apoptosis in Non-Small Cell Lung Cancer by Sponging miR-136-5p and Upregulating BCL2[J]. Mol Cancer Res. 2020，18（5）：748‐756. [4] Zheng J P，Dai Y M，Chen Z，et al. Circular RNA circ-ABCB10 promotes non-small cell lung cancer proliferation and inhibits cell apoptosis through repressing KISS1[J]. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2020，24（5）：2518‐2524.
[5] Yu C，Cheng Z，Cui S，et al. circFOXM1 promotes proliferation of non-small cell lung carcinoma cells by acting as a ceRNA to upregulate FAM83D[J]. J Exp Clin Cancer Res. 2020，39（1）：55.
[6] Dong L，Zheng J，Gao Y，et al. The circular RNA NT5E promotes non-small cell lung cancer cell growth via sponging microRNA-134[J]. Aging （Albany NY）. 2020，12（4）：3936‐3949.
[7] Wu W，Xi W，Li H，et al. Circular RNA circACACA regulates proliferation，migration and glycolysis in nonsmallcell lung carcinoma via miR1183 and PI3K/PKB pathway[J]. International journal of molecular medicine. 2020，45（6）：1814-24.
[8] Cui D，Qian R，Li Y. Circular RNA circ-CMPK1 contributes to cell proliferation of non-small cell lung cancer by elevating cyclin D1 via sponging miR-302e[J]. Mol Genet Genomic Med. 2020，8（2）：e999.
[9] Tian F，Wang Y，Xiao Z，et al. [Circular RNA CircHIPK3 Promotes NCI-H1299 and NCI-H2170 Cell Proliferation Through miR-379 and Its Target IGF1] [J]. Zhongguo fei ai za zhi = Chinese journal of lung cancer. 2017，20（7）：459-467.
[10] Li Y，Hu J，Li L，et al. Upregulated circular RNA circ_0016760 indicates unfavorable prognosis in NSCLC and promotes cell progression through miR-1287/GAGE1 axis[J]. Biochem Biophys Res Commun. 2018，503（3）：2089‐2094.
[11] Pang W，Huang F，Zhang X，et al. Circular RNA hsa_circ_0072309 inhibits non-small cell lung cancer progression by sponging miR-580-3p[J]. Biosci Rep. 2020，40（5）：BSR20194237.
[12] Chen T，Yang Z，Liu C，et al. Circ_0078767 suppresses non-small-cell lung cancer by protecting RASSF1A expression via sponging miR-330-3p[J]. Cell Prolif. 2019，52（2）：e12548.
[13] Chi Y，Luo Q，Song Y，et al. Circular RNA circPIP5K1A promotes non-small cell lung cancer proliferation and metastasis through miR-600/HIF-1α regulation[J]. J Cell Biochem. 2019;120（11）：19019‐19030.
[14] Zhang S，Zeng X，Ding T，et al. Microarray profile of circular RNAs identifies hsa_circ_0014130 as a new circular RNA biomarker in non-small cell lung cancer[J]. Sci Rep. 2018;8（1）：2878.
[15] An J，Shi H，Zhang N，et al. Elevation of circular RNA circ_0003645 forecasts unfavorable prognosis and facilitates cell progression via miR-1179/TMEM14A pathway in non-small cell lung cancer[J]. Biochem Biophys Res Commun. 2019，511（4）：921‐925.