【摘 要】
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非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的一种高度接触型传染病,由于该病毒感染机制极为复杂,能够引起世界范围内的猪群发生致病性死亡.本研究参考Georgia 2007/1株(GenBank登录号:FR682468)的CP530R和F317L基因序列,人工合成PUC57-CMV-HA-CP530R-F317L-BGH质粒,利用Red/ET重组工程技术和ccdB反向筛选技术,将ASFV特定基因定向插入到伪
【机 构】
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华南农业大学动物科学学院,广东广州510642
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非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的一种高度接触型传染病,由于该病毒感染机制极为复杂,能够引起世界范围内的猪群发生致病性死亡.本研究参考Georgia 2007/1株(GenBank登录号:FR682468)的CP530R和F317L基因序列,人工合成PUC57-CMV-HA-CP530R-F317L-BGH质粒,利用Red/ET重组工程技术和ccdB反向筛选技术,将ASFV特定基因定向插入到伪狂犬病毒TK位点,构建重组毒株rBartha-K61-CP530R-F317L.结果 表明,构建成功的感染性克隆在PK-15细胞上完成适应性传代并持续传至20代,PCR扩增得到正确基因条带,测序结果未发现缺失与插入.本研究将外源基因成功插入到pBe-loBAC11-Bartha-K61载体上,重组伪狂犬病毒构建成功,为进一步研制新型ASF活载体疫苗奠定了基础.
其他文献
在湖北省开展猪流行性腹泻病毒(PEDV)的收集与分离鉴定,并对其进行遗传进化分析.将7份RT-PCR检测为阳性的病样接种Vero细胞,通过挑斑纯化及PCR鉴定,获得1株PEDV,命名为HB2018.通过Reed-Muench法测定其毒价为106.7TCID50/mL.该毒株S基因的遗传分析结果显示,其属于GⅡa亚群,与传统疫苗毒株CV777同源性只有93.76％;与目前的商品化疫苗株DR13、AJ1102与LW/L的同源性分别为93.52％,97.40％,97.00％.PEDV 4 mL/头接种26日龄断
为了解农机作业服务研究的现状、特点以及不足,探究农机作业服务的发展规律,为完善农机作业服务研究提供依据.从概念界定、发展历程、供需状况和影响效应等方面对农机作业服务的相关研究进行了系统梳理,对农机作业服务发展的理论基础和内在机制进行了归纳总结.结果 表明:农机作业服务的快速发展得益于有效市场和有为政府的结合,农户面临的劳动力约束、资金约束、技术约束和土地约束引致的需求,自然、经济、政治和社会因素引致的供给,供需作用形成了具有中国特色的农业机械化发展道路.目前农机作业服务研究主要集中于对需求侧和影响效应的分
为检测石榴花水提物(pomegranate flower water extract,PFW)中的主要活性成分及抗炎功效,采用显色法通过紫外分光光度仪对PFW中多糖、黄酮、生物碱、皂苷、多酚、蛋白等活性成分含量进行了检测,通过急性毒性试验确定了PFW的安全性,最后通过测定PFW对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀的抑制作用、血清细胞因子分泌及HE染色切片检测,确定PFW的抗炎作用.结果 显示,PFW中主要活性成分为多糖和多酚,含量分别为(43.84±1.94)％和(22.44±1.62)％,其余活性成分含量均低于1
为掌握福建省种鸡J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的流行情况,采用ELISA方法对福州、莆田和龙岩3个地区6个种鸡场2470份血清样品和2848枚初产蛋分别进行ALV-J抗体和ALV p27抗原检测.结果 显示,福建地区的种鸡场均不同程度感染ALV,ALV-J抗体总阳性率为4.62％,且公鸡的阳性率低于母鸡,龙岩地区的ALV-J抗体阳性率最高,ALV p27抗原总阳性率为7.87％;蛋种鸡和肉种鸡均能感染ALV,蛋种鸡的ALV p27抗原阳性率明显低于肉种鸡;禽白血病阳性率在不同品系种鸡中存在差异,福建地方
受体结合域是决定病毒侵入宿主及其嗜性的关键因素.该研究目的 在于获得具有天然构象且反应原性良好的猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的受体结合域(receptor-binding domain,RBD)蛋白.根据PEDV S蛋白序列(GenBank登录号:AKN45969.1),设计、优化并合成其RBD部分基因序列,并将其亚克隆至杆状病毒双表达载体pFastBacTM Dual上,得到了重组质粒pFBD-PER.将pFBD-PER转化到大肠杆菌DH1
将120只1日龄商品代白羽肉鸡随机分为2组:对照组(铜含量11mg/kg)、高铜组(铜含量330mg/kg).并于试验49 d,采集盲肠组织及其内容物,制作组织切片观察组织变化,原子吸收法检测盲肠内容物铜含量,16S rDNA高通量测序检测盲肠内容物中微生物菌群结构和多样性.结果 显示,与对照组相比,高铜组盲肠中铜含量极显著升高(P＜0.01),且盲肠组织切片可以看出,高铜组盲肠绒毛高度显著降低(P＜0.05),隐窝深度显著增高(P＜0.05),绒毛高度与隐窝深度比值极显著降低(P＜0.01).微生物测序
为了体外研究游离脂肪酸(NEFA)对奶牛多形核中性粒细胞(PMN)跨奶牛乳腺上皮迁移功能的影响,用Tr-answell嵌套构建了跨乳腺上皮迁移模型,并以此模型研究了NEFA对PMN跨乳腺上皮迁移功能的影响.结果 显示,不同浓度的油酸(OA)可显著促进PMN跨乳腺上皮迁移数量(P＜0.01),其作用特点呈剂量依赖效应;棕榈酸(PA)及硬脂酸(SA)对PMN跨乳腺上皮迁移数量并无显著影响(P＞0.05).结果 表明,NEFA不同组分对奶牛PMN迁移功能具有不同的调控作用,通过改善饲料成份和配比提高OA在奶牛体
通过体外培养小鼠腹腔巨噬细胞,分析内源性和外源性前列腺素D2 (PGD2)对大肠杆菌诱导的促炎性细胞因子(TNF-α和IL-1β)、抗炎因子(IL-10)和趋化因子(RANTES)分泌的影响.结果 显示,大肠杆菌诱导的巨噬细胞PGD2合成分泌依赖于细胞中TLR2(TLR2)、TLR4 (TLR4)和NLRP3 (NLRP3)的存在.大肠杆菌诱导的巨噬细胞细胞因子分泌一定程度上依赖于内源性PGD2的合成分泌(P＜0.001).此外,外源性PGD2能够上调大肠杆菌刺激后巨噬细胞促炎性细胞因子(TNF-α和IL
为探究绵羊ESR2基因多态性与产羔性状的相关性,本研究以杜泊羊、滩寒羊、杂一代、杂二代和横交一代5个绵羊群体为研究对象,利用Sequenom Mass ARRAY(R)SNP技术对5个绵羊群体ESR2基因3个错义突变位点进行检测,并与其产羔数进行关联分析.结果 显示,ESR2基因g.73323973C＞T和g.73326795G＞A位点在5个群体中均表现为中度多态(0.25＜PIC＜0.50);g.73353489C＞A位点在滩寒羊群体中表现为低度多态(PIC＜0.25),在杜泊羊、杂一代、杂二代和横交一
制备一种适用于治疗金黄色葡萄球菌小菌落变异株(Staphylococcus aureus small colony variants,SASCVs)感染的硫酸头孢喹肟纳米凝胶.在离子交联剂作用下,通过凝胶材料之间静电作用自组装形成硫酸头孢喹肟纳米凝胶,以外观性状、微观形态、沉降体积比、再分散性、粒径、Zeta电位为指标筛选最优配方后,对比硫酸头孢喹肟纳米凝胶与其商品化注射液治疗SASCVs感染小鼠模型的结果,对硫酸头孢喹肟纳米凝胶进行评价.结果 显示,当三聚磷酸钠、明胶和海藻酸钠的质量浓度分别为0.25,