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目的：了解上海市儿童医院临床分离侵袭性肺炎链球菌的耐药状况、对β内酰胺类抗菌药物的耐药机制，为抗菌药物的合理应用提供参考依据。方法本研究为针对抗菌药物耐药机制的基础性研究。收集上海市儿童医院2005年1月至2011年12月临床分离的侵袭性肺炎链球菌62株，采用E-test法测定分离株对9种抗菌药物的MIC。 PCR扩增肺炎链球菌的青霉素结合蛋白编码基因pbp2x、pbp2b、pbp1a，分析突变与β内酰胺类抗菌药物耐药水平的相关性。 PCR扩增肺炎链球菌的murM基因，分析其突变与β内酰胺类抗菌药物耐药水平的相关性。结果在62株侵袭性肺炎链球菌中，青霉素耐药肺炎链球菌（PRSP）的检出率为43．6％（27/62）。 pbp2b基因保守序列附近的基因突变率，青霉素中介肺炎链球菌（PISP）（100％，25/25）与青霉素敏感肺炎链球菌（PSSP）（3/10）、PSSP（3/10）与PRSP（100％，27/27）之间的差异有统计学意义（χ2分别为21．875和23．310，P均＜0．01）。 pbp2x基因保守序列附近及内部的基因突变率，PISP（84％，21/25）与PSSP（0）、PSSP（0）与PRSP（85．2％，23/27）之间的差异有统计学意义（χ2分别为21．000和22．513，P 均＜0．01）。pbp1a基因保守序列附近及插入序列的基因突变率，PISP（68％，17/25）与PSSP（0）、PRSP（100％，27/27）与PSSP（0）、PRSP（100％，27/27）与PISP（68％，17/25）之间的差异均有统计学意义（χ2分别为13．22、37．000、10．211，P均＜0．01）。 murM基因的碱基突变率，青霉素MIC≥8 mg/L或头孢曲松MIC≥2 mg/L组（95．8％，23/24）和青霉素MIC＜8 mg/L或头孢曲松MIC＜2 mg/L组（0）差异有统计学意义（χ2＝56．2，P＝0．0026）。结论上海市儿童医院分离的侵袭性肺炎链球菌耐药现象严重。pbps基因和murM基因突变在β内酰胺类抗菌药物耐药中均发挥作用，且与抗菌药物耐药水平有一定的相关性。（中华检验医学杂志，2014，37：748-752）