【摘 要】
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目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)反义寡核苷酸及其脂质体对大鼠晶状体上皮细胞(LEC)增殖的抑制作用.方法体外培养大鼠LEC,细胞传代后分别加入bFGF反义和正义寡核苷酸及其脂质体,以营养液和无药脂质体为对照培养24 h后,用噻唑蓝(MTT)法测定细胞的增殖情况,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定细胞bFGF mRNA的表达情况.结果大鼠LEC原代培养24h可见细胞生长,形态为多
【机 构】
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100005,首都医科大学北京同仁眼科中心,北京市眼科研究所药理室,100005,首都医科大学北京同仁眼科中心,北京市眼科研究所药理室,100005,首都医科大学北京同仁眼科中心,北京市眼科研究所药理
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目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)反义寡核苷酸及其脂质体对大鼠晶状体上皮细胞(LEC)增殖的抑制作用.方法体外培养大鼠LEC,细胞传代后分别加入bFGF反义和正义寡核苷酸及其脂质体,以营养液和无药脂质体为对照培养24 h后,用噻唑蓝(MTT)法测定细胞的增殖情况,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定细胞bFGF mRNA的表达情况.结果大鼠LEC原代培养24h可见细胞生长,形态为多边形,培养2～3周细胞汇合成片;传代培养细胞可在1～2周汇合成片.MTT法测定显示,bFGF反义寡核苷酸组(Ⅰ组)、正义寡核苷酸组(Ⅱ组)及营养液组(V组)的吸光度(A值)分别为0.138±0.074、0.325±0.097及0.370±0.079,Ⅰ组A值显著小于Ⅱ和V组(P=0.024,0.005);bFGF反义寡核苷酸脂质体组(Ⅲ组)、正义寡核苷酸脂质体组(Ⅳ组)及无药脂质体组(Ⅵ组)的A值分别为0.128±O.032、0.238±0.120及0.348±0.017,Ⅲ组A值显著小于Ⅵ组(P=0.000).RT-PCR法检测结果显示,以2μg总RNA为模板,循环30次,bFGF反义寡核苷酸、bFGF正义寡核苷酸及营养液的扩增产物的量分别为0.33、0.99及0.85μg;bFGF反义寡核苷酸脂质体、bFGF正义寡核苷酸脂质体及无药脂质体的扩增产物的量分别为O.23、0.48及0.56μg.结论大鼠LEC可在体外培养;bFGF反义寡核苷酸及其脂质体可减少bFGF的mRNA含量,并抑制体外培养的大鼠LEC增殖.(中华眼科杂志,2004,40:528-532)
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