【摘 要】
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目的:观察核心结合因子al (Cbfal )对成人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)向成骨细胞定向分化的诱导作用.方法:经密度梯度离心法和贴壁筛选法获得hBMSCs.非病毒载体FuGene HD携带Cb
【机 构】
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天津市天津医院骨科,天津市天津医院骨科研究所
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目的:观察核心结合因子al (Cbfal )对成人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)向成骨细胞定向分化的诱导作用.方法:经密度梯度离心法和贴壁筛选法获得hBMSCs.非病毒载体FuGene HD携带Cbfa 1转染hBMSCs后7、14 d,经Real-time PCR分析hBMSCs成骨细胞标志基因表达,包括Cbfal 、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)、骨桥蛋白(OPN)和Ⅰ型胶原;培养1、2和3周,ALP染色、钙结节染色检测成骨分化.结果:培养的hBMSCs阳性表达CD73,阴性表达CD34.第3代细胞增殖曲线呈"S"形,符合对数生长曲线.Cbfal转染hBMSCs表现出与成骨细胞相似的形态,成骨细胞标志基因ALP、OC 、OPN和Ⅰ型胶原的表达均明显上调,ALP染色阳性,并且有明显的钙结节形成.结论:非病毒载体携带Cbfal转染hBMSC,可诱导其向成骨细胞分化.
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