【摘 要】
：
目的 探索利用昆虫杆状病毒表达系统（IBEVS）表达的重组人乳头瘤病毒（HPV）58型主要衣壳蛋白L1病毒样颗粒（VLP）的简单可行的层析分离方法。方法 收集高水平表达HPV-58 L1的昆虫细胞并制备裂解上清，建立硫酸铵沉淀（ASP）联合层析法纯化L1蛋白的最佳条件，对纯化后的蛋白进行体外组装。对L1蛋白的纯化各个阶段中的组分、最终产品（纯品蛋白）及组装状态进行理化性质鉴定，分析其免疫原性。结果
【机 构】
：
中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物物理及结构生物学系
【基金项目】
：
国家自然科学基金（31970867）； 中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目（2021-I2M-1-043）；
论文部分内容阅读
目的 探索利用昆虫杆状病毒表达系统（IBEVS）表达的重组人乳头瘤病毒（HPV）58型主要衣壳蛋白L1病毒样颗粒（VLP）的简单可行的层析分离方法。方法 收集高水平表达HPV-58 L1的昆虫细胞并制备裂解上清，建立硫酸铵沉淀（ASP）联合层析法纯化L1蛋白的最佳条件，对纯化后的蛋白进行体外组装。对L1蛋白的纯化各个阶段中的组分、最终产品（纯品蛋白）及组装状态进行理化性质鉴定，分析其免疫原性。结果 30%饱和硫酸铵（AS）分级分离后，L1蛋白得率为72%,纯度为9.34%;阴离子交换层析经300 mmol/L NaCl缓冲液洗脱后，L1蛋白得率>90%,纯度为13.6%;进一步经羟基磷灰石层析收获流穿液后，L1蛋白得率>80%,宿主蛋白质残留（HCPs）分析和L1蛋白的SDS-PAGE考马斯亮蓝染色显示蛋白纯度>99%。经上述3步分离纯化的L1蛋白，其总得率为55.7%,每升细胞悬浮培养液（约3.0×10~9个细胞）产量为57～65 mg。动态光散射（DLS）和透射电镜（TEM）分析显示，L1蛋白组装成了形状均一、直径约55 nm的VLPs。该法制备HPV-58 L1 VLPs诱导小鼠免疫系统产生的中和抗体水平与超离法制备的相当。结论 本研究所建立的HPV58-L1 VLPs分离纯化方法是一套具有蛋白得率高、活性好，且操作简单等特点的成熟方案，为利用IBEVS生产成本低的HPV多价预防性疫苗奠定基础。
其他文献
详细分析了2021年高考物理江苏卷第10题，该题侧重考查学生的科学思维能力，从教师的视角定量研究了均匀带电半球面截面和轴线上的电势和电场强度。
微课教学法是利用微课进行数学教学的方法,它可以较好地引起学生的学习兴趣,提高学生的学习效率,更可以帮助学生拓展思维空间,提升学生的自主学习能力。在高中数学教学中,教师将微课引入数学教学中,不仅可以有效提升数学教学实效,更能激活学生的学习潜能,焕发数学课堂的活力,拓展数学探索的空间。
消化道肿瘤患者在化疗期间容易发生营养不良状况，常规护理往往无法从根本上解决患者的营养问题，选择行之有效的护理尤为必要，为研究消化道肿瘤病人化疗期间实施饮食护理对营养状况的影响，研究人员对66例化疗期消化道肿瘤病人展开研究。将66例化疗期消化道肿瘤患者随机分为对照组和实验组，各33例，对照组男性15例，女性18例，年龄35-67岁，平均45岁，其中胃癌20例、结肠癌8例、食管癌5例；实验组男性
采用两种热输入不同的焊接工艺参数对3 mm壁厚的Inconel 617镍基高温合金进行激光焊接。通过光学显微镜和扫描电子显微镜对焊接接头显微组织进行观察分析，并测试了焊接接头在室温（25 ℃）及高温（900 ℃）下的拉伸性能。结果表明：激光焊接热输入对Inconel 617焊接接头显微组织及力学性能影响明显。在高热输入（200 J/mm）条件下，焊缝正面宽度3.88 mm，熔化区中部晶粒尺寸粗大，
近年来，我国经济发展迅速，能源短缺的问题严重制约着我国经济的进一步发展。煤炭、石油传统能源大量消耗带来的环境污染问题引起全世界的高度关注，急需新能源的出现破解我国高质量发展难题。新能源可循环利用的优点可以解决我国能源缺乏和环境污染的问题，新能源汽车也逐渐成为我国汽车行业的翘楚。比亚迪股份有限公司在我国新能源行业贡献巨大，其盈利能力是非常值得我们去深入研究的。分析比亚迪的盈利质量、未来发展潜力，可以
近期的水模研究表明,CT采集参数和重建技术的变化可能很大程度上降低影像组学特征的可重复性,导致其在临床预后研究中应用受限。目的研究CT辐射剂量和重建
城市文化建筑的架空空间是使用者多元化的重要公共活动场所，本文以合肥中环艺术馆为例，通过行为观察法对架空空间内使用者构成、行为空间分布特点进行研究，并对影响架空空间内的空间要素进行实证分析，总结空间要素与使用者行为活动之间的关系，归纳提升架空空间的空间活力的因素，为城市中文化建筑的架空空间的设计提供参考。
建筑是人类历史文化长河中的一大风景。作为公平正义的守护地,法院建筑更是在庄严的基础上各有风姿,体现了各地法院不同的文化特色与审美旨向。本期我们选编一组法院建筑摄影作品,展示人民法院的建筑风采。
本文设计一个高压氧舱无线温湿度智能监控系统,系统由上位机和下位机两部分构成,其中上位机包括无线接收模块、有线数据传送模块和温湿度控制操作界面三个部分,利用图形化编程语言LabVIEW实现对PC机串口数据的读取,并在上位机的控制界面上显示数值、记录数据、绘制各时间点温湿度变化曲线,在检测数据超出设定值时会实现上位机报警功能。
在国家提出“一带一路”重大倡议的背景下，文化馆应抓住发展机遇，积极开展对外文化交流活动，实现文化馆高质量发展。