论文部分内容阅读
目的
探讨游离脂肪酸是否通过改变胰岛素信号传导蛋白的表达和功能状态影响胰岛素在肝细胞内的信号传导。
方法分离培养Wistar大鼠肝细胞，以软脂酸（0.25 mmol/L）或油酸（0.125 mmol/L）与肝细胞共同孵育6、12、24小时，提取蛋白后用Western印迹方法检测胰岛素受体和胰岛素受体底物-1（IRS-1）的蛋白水平，同时应用免疫沉淀和免疫杂交技术检测胰岛素刺激后胰岛素受体β亚单位和IRS-1的酪氨酸磷酸化程度。
结果（1）软脂酸和油酸实验组肝细胞的胰岛素受体蛋白表达量在各个时间点均无改变。（2）肝细胞与软脂酸和油酸共同孵育12和24小时后胰岛素受体β亚单位的酪氨酸磷酸化显著降低（P<0.05）。（3）肝细胞与软脂酸或油酸共同孵育6小时，IRS-1蛋白量无明显变化，而12和24小时后则显著降低。（4）软脂酸和油酸实验组的肝细胞在胰岛素刺激后IRS-1的酪氨酸磷酸化在各个时间点均显著降低。
结论游离脂肪酸可能通过抑制IRS-1蛋白表达、胰岛素受体和IRS-1的酪氨酸磷酸化阻滞胰岛素信号传导，引起胰岛素抵抗。