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目的
探讨脂肪间充质干细胞(ADSCs)移植对肝纤维化的治疗作用及其机制。
方法取大鼠腹股沟区皮下脂肪组织,分离ADSCs。将四氯化碳腹腔注射诱导肝纤维化大鼠,并随机分为细胞移植组和磷酸盐缓冲液注射组,另设正常喂养大鼠为阴性对照组。细胞移植组经尾静脉注射ADSCs,磷酸盐缓冲液注射组用0.5 ml磷酸盐缓冲液注射。移植后7 d取下腔静脉血行肝脏生物化学指标测定,取肝组织检测肝细胞生长因子与α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达水平;用Masson三色法染色检测肝内胶原沉积,采集肝纤维化大鼠肝星状细胞(HSCs),体外与ADSCs间接共培养,探讨ADSCs对HSCs增殖和凋亡的影响。各组比较分别进行组间独立t检验,多样本均数比较采用方差分析。
结果细胞移植组肝组织中见ADSCs驻留,细胞移植组肝细胞坏死、空泡化、纤维化面积较磷酸盐缓冲液注射组明显减轻;细胞移植组的血清转氨酶水平明显下降,白蛋白水平差异无统计学意义,细胞移植组肝细胞生长因子蛋白表达明显上调,而α-平滑肌肌动蛋白表达明显下调(P值均<0.05);体外细胞共培养72 h后结果提示ADSCs对HSCs增殖具有抑制作用,与HSCs单独培养对照组比较差异有统计学意义,Caspase3免疫染色法检测共培养72 h后HSCs的凋亡率为23.42%±3.02%,与HSCs单独培养对照组(14.82%±3.93%)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论ADSCs移植可通过上调肝细胞生长因子表达,促进HSCs凋亡,缓解肝纤维化。