目的构建烟曲霉额外拷贝菌株,了解额外拷贝烟曲霉sho 1、pbs 2基因能否增强菌株对高渗透压、过氧化氢(H2O2)、碱性pH、刚果红应激的抵抗能力,探讨HOG通路(high osmolarity glycerol pathway)参与的应激反应。方法用原生质体法构建分别含有烟曲霉sho 1、pbs 2基因的额外拷贝菌株,采用Real-time PCR方法检测额外拷贝株中sho 1、pbs 2的表达情况。观察并比较缺陷株、额外拷贝株对NaCl(1 mol/L)、H2O2(5 mmol/L)、刚果红(400 mg/L)及碱性pH(10.0)应激的反应。结果获得了含有烟曲霉sho 1、pbs 2基因的额外拷贝菌株MCsho1、MCpbs2,和含空白质粒的对照株Empty。额外拷贝株sho 1、pbs 2的表达水平增高,对NaCl(1 mol/L)、H2O2(5 mmol/L)、刚果红(400 mg/L)、碱性pH(10.0)应激的抵抗强于Empty。MCpbs2对这些应激的抵抗较MCsho1更显著。烟曲霉缺陷株△sho 1、△pbs 2对NaCl(1 mol/L)、H2O2(5mmol/L)、碱性pH(10.0)的敏感性高于野生株AF293。△sho 1对刚果红(400 mg/L)的敏感性高于野生株,△pbs 2对刚果红的敏感性与野生株比,无显著差别。结论额外拷贝烟曲霉sho 1或pbs 2基因能增强菌株对高渗透压、氧化压力、刚果红、碱性pH应激的抵抗能力。