柚皮苷抑制纤维化相关蛋白表达改善大鼠肾细胞纤维化

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目的:探讨柚皮苷(naringin, NAR)对转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)诱导的肾纤维化的作用。方法:采用不同浓度TGF-β1诱导正常大鼠肾细胞构建肾纤维化细胞模型,根据α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的转录水平确定TGF-β1的最佳诱导浓度;将细胞分为正常组、TGF-β1组、TGF-β1+NAR(1μmol·L-1)组、TGF-β1+NAR(10μmol·L-1)组、TGF-β1+NAR(40μmol·L-1)组,细胞处理完成后,采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞活力;显微镜观察法观察细胞形态变化;免疫荧光法检测结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)和纤维连接蛋白(fibronectin1,FN1)表达;Western Blot法检测Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)的表达。结果:5μg·L-1 TGF-β1为肾纤维化细胞模型建立的最佳诱导浓度。CCK-8检测显示,NAR可抑制肾纤维化模型细胞异常增殖。与正常组比较,TGF-β1组CTGF、FN1、CollagenⅠ表达水平显著升高(P<0.05),细胞形态发生变化,出现纤维化;与TGF-β1组比较,NAR给药组CTGF、FN1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),CollagenⅠ表达水平呈剂量依赖性降低(P<0.05),细胞纤维化得到改善。结论:柚皮苷可通过抑制CTGF、FN1和CollagenⅠ蛋白表达改善TGF-β1诱导的肾纤维化。
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