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通过对预处理剂质量浓度、酶质量浓度、酶解时间、菌龄等影响因素的分析。以及渗透压稳定剂的筛选，对酒酒球菌SD-2a原生质体的制备条件进行了研究。结果表明，酒酒球菌SD-2a原生质体制备的最佳条件为：菌龄20h。青霉素G钠质量浓度0．5μg／mL，酶质量浓度1mg/mL，酶解时间30min,渗透压稳定剂采用SMM缓冲液，再生培养基采用添加0．7mol／L KCl的ATB培养基，再生培养时采用双层培养基厌氧培养，可以保证较好的形成率和再生率。