丙型肝炎病毒优势表位嵌合抗原在大肠杆菌中的表达及其在血清学检测中的应用

来源 :中华传染病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:vicky1924
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目的获得具有多表位的丙型肝炎病毒(HCV)嵌合抗原,以提高HCV酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断试剂的质量.方法采用分子克隆将已获得的HCV各区段优势抗原表位基因,拼接为HCV嵌合抗原基因.将该基因克隆到pQEE-30载体表达.表达抗原经纯化后,包被酶联板,对16份HCV阴性和16份阳性血清标本进行了检测.结果pQE-HCV在大肠杆菌中有效表达了相对分子质量为53000的HCV嵌合抗原.经Ni-NTA金属螯合层析纯化后,获得了高纯度的目的蛋白.ELISA结果显示,HCV嵌合抗原能特异地与HCV感染血清反应,具有良好的抗原活性.结论HCV多表位嵌合抗原包含了HCV具有代表性的主要表位,是HCV免疫学检测的良好试剂.

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目的 构建恶性疟原虫FCC-1/HN株CSP基因的重组真核表达质粒pBK-CSP,在大肠杆菌中进行表达,并进行鉴定。方法 采用限制性内切酶法从重组的大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒pBCG5 6/CSP中分离出经过测序鉴定的CSP基因片段,将其亚克隆于pBK CMV真核表达载体,构建重组真核表达质粒pBK-CSP。经IPTG诱导,重组质粒在大肠杆菌DH5α中进行表达,并进行SDSPAGE及免疫印迹分析。
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