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漆酶工程菌株的构建及其培养条件的研究

来源 :微生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：teddy18chen

【摘 要】

：

提取产漆酶白腐菌(Fomelignosus)的总RNA,利用RT-PCR的方法克隆到漆酶的cDNA,并将其克隆到表达载体pPIC9k,重组质粒经线性化、电激转化Pichia pastoris GS115、通过底物显色

【作 者】

：

刘卫晓 钞亚鹏 钱世钧 

【机 构】

：

中国科学院微生物研究所

【出 处】

：

微生物学报

【发表日期】

：

2004年5期

【关键词】

：

漆酶 工程菌 菌株 培养 重组质粒 Laccase Engineered strain Culture conditions 

【基金项目】

：

国家重点实验室基金

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论文部分内容阅读

提取产漆酶白腐菌(Fomelignosus)的总RNA,利用RT-PCR的方法克隆到漆酶的cDNA,并将其克隆到表达载体pPIC9k,重组质粒经线性化、电激转化Pichia pastoris GS115、通过底物显色反应筛选到漆酶生产工程菌株.其中2*工程菌株产酶活力较高.培养基、培养温度、诱导用甲醇浓度及培养基中铜离子浓度对该菌产酶活力均有一定的影响.在最适条件下(用含200μmol/L Cu2+的BMMY培养基,于20℃,250r/min;用0.5%甲醇诱导)培养至第6天时,该菌株产酶活力达到最高(1

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