观察17β-雌二醇对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的椎间盘细胞凋亡及基质降解的影响。
方法通过Ⅱ型胶原酶消化分离大鼠原代椎间盘细胞,并将椎间盘细胞分为5组,分别为正常组、IL-1β组、IL-1β+0.1、1.0、10.0 μmol/L的17β-雌二醇组。并检测各组细胞活力、凋亡率、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)活性、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)、IL-6含量、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13表达,组间比较采用t检验。
结果与正常组(0.48±0.04)比较,IL-1β组(0.35±0.03)中椎间盘细胞活力降低(t=5.896,P<0.01);与IL-1β组比较,0.1,1.0,10.0 μmol/L的17β-雌二醇组细胞活力提高(0.43±0.04比0.35±0.03,t=6.154,P<0.01;0.51±0.05比0.35±0.03,t=6.127,P<0.01;0.62±0.06比0.35±0.03,t=5.920,P<0.01)。与正常组比较,细胞早期凋亡率降低[(12.42±1.19)%比(18.52±1.64)%,t=6.295,P<0.01;(7.56±0.76)%比(18.52±1.64)%,t=6.127,P<0.01;(3.62±0.40)%比(18.52±1.64)%,t=6.570,P<0.01];晚期凋亡率降低[(11.44±1.18)%比(17.39±1.74)%,t=6.236,P<0.01;(8.24±0.82)%比(17.39±1.74)%,t=5.907,P<0.01;(5.17±0.52)%比(17.39±1.74)%,t=6.575,P<0.01],Caspase-3活性降低(3.85±0.38比4.32±0.43,t=6.397,P<0.01;2.91±0.33比4.32±0.43,t=5.685,P<0.05;2.02±0.23比4.32±0.43,t=5.889,P<0.01)。与正常组比较,TNF-α含量降低[(6.50±0.65) ng/L比(8.74±0.89) ng/L,t=5.798,P<0.05;(5.58±0.56) ng/L比(8.74±0.89) ng/L,t=6.701,P<0.01;(3.86±0.39) ng/L比(8.74±0.89) ng/L,t=6.352,P<0.01],IFN-γ含量降低[(15.28±1.53) ng/L比(17.34±1.73) ng/L,t=6.136,P<0.01;(13.12±1.30) ng/L比(17.34±1.73) ng/L,t=6.520,P<0.05;(10.67±1.08) ng/L比(17.34±1.73) ng/L,t=6.735,P<0.05]及IL-6含量降低[(2.23±0.22) ng/L比(2.78±0.28) ng/L,t=6.199,P<0.01;(1.86±0.18) ng/L比(2.78±0.28) ng/L,t=5.989,P<0.05;(1.57±0.16) ng/L比(2.78±0.28) ng/L,t=5.449,P<0.05]。与正常组比较,bax表达量下调[(0.52±0.05) μmol/L比(0.75±0.07) μmol/L,t=6.429,P<0.01;(0.33±0.03) μmol/L比(0.75±0.07) μmol/L,t=6.380,P<0.01;(0.31±0.30) μmol/L比(0.75±0.07) μmol/L,t=6.118,P<0.01]、MMP-3表达量下调[(0.70±0.07) μmol/L比(1.78±0.18) μmol/L,t=6.225,P<0.01;(0.40±0.04) μmol/L比(1.78±0.18) μmol/L,t=6.485,P<0.01;(0.38±0.04) μmol/L比(1.78±0.18) μmol/L,t=6.106,P<0.05],bcl-2表达量上调[(0.50±0.05) μmol/L比(0.30±0.03) μmol/L,t=6.120,P<0.01;(0.95±0.09) μmol/L比(0.30±0.03) μmol/L,t=6.625,P<0.01;(1.20±0.12) μmol/L比(0.30±0.03) μmol/L,t=6.460,P<0.01]。与正常组比较,1.0、10.0 μmol/L的17β-雌二醇组MMP-3表达量下调[(0.25±0.03) μmol/L比(0.93±0.12) μmol/L,t=5.259,P<0.05;(0.32±0.09) μmol/L比(0.99±0.15) μmol/L,t=5.556,P<0.05];1.0、10.0 μmol/L的17β-雌二醇组MMP-13表达量下调[(0.20±0.02) μmol/L比(0.88±0.09) μmol/L,t=6.479,P<0.01;(0.20±0.02) μmol/L比(0.88±0.09) μmol/L,t=6.732,P<0.01]。
结论17β-雌二醇能抑制IL-1β诱导的椎间盘细胞凋亡及细胞外基质降解。