逆转录—半套式—聚合酶链反应单管法检测血清中HCV RNA

来源 :上海医学检验杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sgqeye

【摘要】

：

目的探讨建立一种更简便,更特异灵敏的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)单管法.方法采用蜡隔将RT和PCR扩增2个独立的反应体系在1个Eppendoff(Ep)管中分隔开来,设计内外引物,优化

【作者】

：

贺波周晶李莎

【机构】

：

青岛大学医学院附院,湖北省人民医院检验科

【出处】

：

上海医学检验杂志

【发表日期】

：

2002年2期

【关键词】

：

聚合酶链反应丙型肝炎病毒 HCV RNA RT-PCR单管法

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目的探讨建立一种更简便,更特异灵敏的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)单管法.方法采用蜡隔将RT和PCR扩增2个独立的反应体系在1个Eppendoff(Ep)管中分隔开来,设计内外引物,优化反应体系及条件,使整个检测反应经高温启动继而连续封闭地完成.结果在60例血透析患者血清中,33例(55%)抗-HCV-IgG阳性和27例抗-HCV-IgG阴性血清用单管RT-PCR分别检出28例(85%)和3例(9%)HCV RNA阳性,并对3份阳性PCR产物作核酸序列测定.本方法的检测灵敏度为102拷贝/ml.结论

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