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目的
观察脂肪细胞因子丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)是否通过IRS/PI3K/Akt/Glut信号通路改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗。
方法以棕榈酸(PA)培养3T3-L1脂肪细胞构建胰岛素抵抗模型，分为PA组、PA＋100 ng/ml Vaspin组、PA＋200 ng/ml Vaspin组、PA＋400 ng/ml Vaspin组及PA＋400 ng/ml Vaspin＋Wortmannin(PI3K抑制剂)组。运用2-脱氧-H3-D-葡萄糖掺入法及葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法分别检测细胞葡萄糖摄取和消耗量。以RT-PCR和Western blot检测胰岛素信号通路中、酪氨酸磷酸化胰岛素受体底物1(p-IRS-1)、Akt、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和Glut-4的mRNA和蛋白表达水平。
结果与PA组相比，随着Vaspin浓度增加，葡萄糖摄取和消耗量逐渐增加(P<0.05)，IRS-1和Akt的mRNA和蛋白磷酸化水平逐渐上升(P<0.05)，p-IRS-1/IRS-1、p-Akt/Akt比值逐渐增加，同时Glut-4的mRNA和蛋白表达也相应上调(P<0.05)。与400 ng/ml Vaspin干预组相比，PA＋400 ng/ml Vaspin＋Wortmannin组葡萄糖摄取和消耗量降低，IRS-1和Akt的mRNA和蛋白磷酸化水平下降(P<0.05)，p-IRS-1/IRS-1、p-Akt/Akt比值下降，且Glut-4的mRNA和蛋白表达下调(P<0.05)。
结论Vaspin通过激活IRS/PI3K/Akt/Glut胰岛素信号通路，改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗。