【摘 要】
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目的:构建人4-1BB胞膜外区-hIgG1Fc融合蛋白真核表达载体.方法:PCR扩增人4-1BB胞膜外区和hIgG1Fc基因片段,用HindⅢ、Pst I酶切4-1BB胞膜外区,PstI、EcoR I酶切hIgG1Fc,Hind
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目的:构建人4-1BB胞膜外区-hIgG1Fc融合蛋白真核表达载体.方法:PCR扩增人4-1BB胞膜外区和hIgG1Fc基因片段,用HindⅢ、Pst I酶切4-1BB胞膜外区,PstI、EcoR I酶切hIgG1Fc,HindⅢ、EcoRI酶切pCDNA3,纯化后的酶切产物经T4DNA连接酶连接,转化大肠杆菌DH5α,氨苄青霉素筛选阳性克隆,PCR及测序鉴定.结果:连接反应产物转化大肠杆菌DH5α,氨苄青霉素筛选出多个阳性克隆;分别以针对4-1BB胞膜外区和hIgG1Fc的引物进行PCR扩增,电泳后观察
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