结核分枝杆菌分泌蛋白MPT53基因的克隆、表达和纯化

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lkh007

【摘要】

：

目的构建结核杆菌分泌蛋白MPT53原核表达载体并进行表达和纯化。方法以结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组DNA为模板扩增MPT53基因，产物经纯化回收后与载体pMD-T连接转化，酶切鉴定，

【作者】

：

唐宇龙杨华刘湘新秦莲花柳彬胡忠义

【机构】

：

上海市结核重点实验室,湖南农业大学动物医学院

【出处】

：

中国病原生物学杂志

【发表日期】

：

2007年1期

【关键词】

：

结核分枝杆菌 MPT53 克隆表达 Mycobacteriurn tuberculosis MPT53 clone expression

【基金项目】

：

上海市科委资助项目（No.05DZ22320）.

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目的构建结核杆菌分泌蛋白MPT53原核表达载体并进行表达和纯化。方法以结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组DNA为模板扩增MPT53基因，产物经纯化回收后与载体pMD-T连接转化，酶切鉴定，克隆到pET32a原核表达载体，测序鉴定插入序列完全正确者转化大肠埃希菌BL21，诱导表达MPT53融合蛋白，亲和层析纯化后，进行SDS-PAGE电泳鉴定。结果成功构建PET32a-MPT53重组质粒，转化BL21后经IPGT诱导成功表达分子质量单位为36ku的MPT53蛋白，与理论值相符。结论成功表达结核分枝杆菌MPT

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