鸡源志贺菌IpaC基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达

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为使IpaC基因表达产物保持天然的生物学活性,实现在酵母表达系统中高效表达,本研究在不改变IpaC蛋白氨基酸序列的情况下,根据酵母密码子偏爱性优化合成IpaC#基因,分别构建真核表达载体pGAPZaA-/paC和pGAPZaA-IpaC,然后将线性化重组质粒电转化至毕赤酵母X-33中,对阳性转化子用SDS-PAGE及Western blot检测其表达产物.结果表明,经SDS-PAGE及Western blot检测,仅在pGAPZaA-IpaC#/X-33重组菌表达产物菌体沉淀中检测到大小为70ku的目的蛋
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