【摘 要】
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目的 考察磁珠固定多抗吸附细胞裂解液中酶/突变体,分析吸附酶活性对样品蛋白量响应曲线预测最大吸附活性（Vs）用于比较识别阳性突变体的可靠性。方法 纯化重组表达大肠杆菌碱性
【机 构】
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重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室
【基金项目】
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国家863项目(No.2011AA02A108);国家自然科学基金资助项目(No.30672009,No.31570862);教育部博士点基金资助项目(No.20125503110007)~~
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目的 考察磁珠固定多抗吸附细胞裂解液中酶/突变体,分析吸附酶活性对样品蛋白量响应曲线预测最大吸附活性（Vs）用于比较识别阳性突变体的可靠性。方法 纯化重组表达大肠杆菌碱性磷酸酶（ECAP）及绿脓杆菌芳香硫酸酯酶（PAAS）为免疫原;兔抗血清用33%硫酸铵分级和DEAE-纤维素层析纯化得多抗。磁珠羧基活化后固定多抗;用对硝基酚显色底物,碱终止后测定405nm吸收增量反映酶活性;分析吸附响应曲线预测Vs。结果 多抗磁珠吸附酶的容量约2.0mg/g磁珠。ECAP比活性超过PAAS比活性70倍。ECAP突变体R1
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