双孢蘑菇中精氨酸酶的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

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目的提供一种制备精氨酸酶特异性多克隆抗体的方法。方法首先对双孢蘑菇中编码精氨酸酶的基因(AbArg)进行聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增,构建重组质粒pET-28a(+)-Arg,再将质粒转入感受态细胞E.coli BL 21中诱导表达,获得含有6×His标签的融合蛋白,最后用纯化后的蛋白免疫新西兰大白兔,获得抗血清。结果构建了重组质粒pET-28a(+)-Arg,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表明诱导出的融合蛋白以包涵体形式存在,经纯化
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