目的:建立一种新方法以用于体外培养扩增人脐血来源的NK细胞,从而为NK细胞的治疗奠定基础。方法:收集人脐血单个核细胞,将细胞按1.5×10⁶/ml悬浮于含5%自体血浆、重组人IL-15（50 ng/ml）和氢化考的松琥珀酸钠(5×10^-8mol/L)组成的无血清培养液中,接种于含肝素钠或/和重组抗人CD16单克隆抗体铺板（预先铺板）的培养瓶中,其剂量分别为100 U/cm²和1μg/cm²底面积。培养2周后收集细胞,计细胞总数,应用流式细胞术检测细胞中CD3^-/CD56⁺比例。以K562细胞为靶细胞,应用MTT实验观察不同效靶比条件下的NK的细胞毒作用。结果:与未铺板培养体系比较,抗CD16抗体及肝素钠铺板体系培养的细胞,在培养1周内易见贴壁的集落。培养2周后,预先铺板组细胞扩增倍数明显高于未铺板组,且CD3^-/CD56⁺比例显著升高,尤以抗体和肝素混合铺板组为显著（P<0.01）。MTT实验显示,预先铺板培养组所获得细胞对K562细胞的杀伤活性更强。结论:利用肝素和抗CD16抗体铺板,在培养体系中加入IL-15和氢化考的松,可使NK细胞优势扩增,从而获得纯度较高、细胞毒活性较强的NK细胞。