【摘 要】
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[目的]探讨人Rh(D)血型抗原模拟表位筛选及鉴定的临床意义.[方法]以抗Rh(D)单克隆抗体作为固相筛选分子,随机选取35个进行克隆,经噬菌体酶联免疫吸附测定法(ELISA)及交叉试验
【机 构】
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郑州颐和医院检验医学中心,河南 郑州 450047
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[目的]探讨人Rh(D)血型抗原模拟表位筛选及鉴定的临床意义.[方法]以抗Rh(D)单克隆抗体作为固相筛选分子,随机选取35个进行克隆,经噬菌体酶联免疫吸附测定法(ELISA)及交叉试验,确定阳性克隆,采用蛋白石免疫印迹法(Western blot)对噬菌体行抗原性分析.[结果]DNA序列测序及竞争抑制实验在11个克隆的噬菌体所展示的外源多肽中有4个克隆无共性,可能是非特异性结合.7个具有克隆氨基酸序列均含有相同的脯氨酸(P)、色氨酸(W)、谷氨酸(Q)结构(-WP-Q-),超过40％的抑制率.Western blot分析表明,被选定的噬菌体能被抗Rh(D)血清特异识别,抗原性与Rh(D)蛋白相类似.[结论]利用抗Rh(D)单克隆抗体筛选噬菌体随机肽库,可获得具有(-WP-Q-)结构的Rh(D)抗原模拟表位.
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