PCR-RFLP法鉴别罗布麻与混淆品白麻及其psbA-trnH序列分析

来源 :药学与临床研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:crazyinlove_2008
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目的:基于叶绿体psbA-trnH基因间隔区序列,建立一种PCR-RFLP(聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性)方法鉴别罗布麻(Apocynum venetum L.)及其混淆品白麻(Apocynum pictum),并验证psbA-trnH序列酶切位点种间特异性和种内保守性.方法:将罗布麻和白麻提取总DNA,扩增psbA-trnH序列,扩增产物双向测序.序列分析发现,罗布麻含有特异性酶切位点SspⅠ.结果:扩增产物psbA-trnH为300~400 bp.罗布麻psbA-trnH产物均可以被SspⅠ酶切成两条条带,白麻却不能被SspⅠ酶切.生物信息分析结果表明,在罗布麻属中,罗布麻psbA-trnH序列的SspⅠ酶切位点具有种间特异性和种内保守性,在夹竹桃族进化树中,罗布麻与白麻距离最近.结论:本实验建立的PCR-RFLP方法可以有效鉴别罗布麻和白麻.
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目的:考察枸橼酸西地那非凝胶剂的基质,并对其体外溶出度进行测定.方法:建立枸橼酸西地那非含量测定高效液相色谱法,筛选了该凝胶剂的处方工艺.结果:HPLC法以pH 3.0三乙胺-甲醇-乙腈(58:25:17,V:V:V)作为流动相;采用ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),在5~100μg·mL-1的浓度范围内枸橼酸西地那非线性关系良好,线性方程为Y=25.58X-2.9823,r2=0.9997;通过单因素实验考察,以10%明胶-3%蔗糖作为凝胶基质的处方;通过药物含量及