【摘 要】
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目的 观察猪脂肪来源干细胞的分离、体外培养方法 及基本生物学特性,探讨其多向诱导分化潜能.方法 取猪颈部皮下脂肪组织,酶消化法获得脂肪干细胞,细胞免疫荧光及流式细胞技
【机 构】
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首都医科大学附属北京朝阳医院普外科,中国医学科学院基础医学研究所,山东省潍坊市人民医院普外科
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目的 观察猪脂肪来源干细胞的分离、体外培养方法 及基本生物学特性,探讨其多向诱导分化潜能.方法 取猪颈部皮下脂肪组织,酶消化法获得脂肪干细胞,细胞免疫荧光及流式细胞技术检测细胞表面抗原,诱导其向脂肪细胞、软骨细胞和成骨细胞分化,油红染色、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和茜素红染色检测细胞诱导分化.结果 成功培养出脂肪干细胞,流式细胞术检测CD44、CD105的阳性率分别为90.2%和99.2%,CD34、CD45的阳性率分别为0.3%和1.2%.成脂肪诱导3周后经油红O染色显示细胞内有脂滴形成,诱导成功率为93%,RT-PCR检测显示细胞能表达过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-γ);成软骨诱导4周后,RT-PCR检测结果 显示细胞能表达软骨聚集蛋白聚糖(aggrecan)和Ⅱ型胶原;成骨诱导3周后,茜素红染色发现细胞出现钙结节,诱导成功率为94%.结论 猪脂肪干细胞在体外具有向成脂肪、成软骨和成骨细胞分化的潜能,有望成为组织工程较理想的种子细胞之一.
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