人朊蛋白相关蛋白Shadoo的表达、纯化及抗体的制备

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：niehaibin

【摘要】

：

目的克隆、表达和纯化人朊蛋白相关Shadoo（SHO）蛋白并制备抗Shadoo的多克隆抗体。方法提取仓鼠各组织的mRNA，分析SHO基因在仓鼠各组织中转录水平的差异;提取人DNA，PCR方法获得人S

【作者】

：

高永军高晨陈建明石琦郭燕张宝云董小平

【机构】

：

中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、传染病预防控制国家重点实验室

【出处】

：

中国病原生物学杂志

【发表日期】

：

2007年3期

【关键词】

：

Shadoo 朊蛋白蛋白纯化多克隆抗体 Shadoo prion protein protein purification polyclonal antib

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（No.30500018、30571672）,欧盟,中国及中东欧变异型克雅病监测项目（No.QLRT200001441）,国家科技攻关计划项目（No.2003BA712A04-02）.

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目的克隆、表达和纯化人朊蛋白相关Shadoo（SHO）蛋白并制备抗Shadoo的多克隆抗体。方法提取仓鼠各组织的mRNA，分析SHO基因在仓鼠各组织中转录水平的差异;提取人DNA，PCR方法获得人SHO基因，克隆至融合表达载体，在大肠埃希菌中表达人SHO蛋白并纯化;以纯化蛋白为抗原免疫家兔制备抗血清，用Western blot方法分别检测与重组及内源性SHO蛋白的免疫反应性。结果SHO基因在仓鼠各组织中的转录水平差异很大，脑组织转录水平高。在大肠埃希菌中表达了分子质量单位为37 ku的人SHO融合蛋白，制

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