烟草24kD PR蛋白基因的克隆及序列分析

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:corber
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烟草24kDPR蛋白裂解晚疫病菌(Phytophthorainfestans)孢子囊并抑制其菌丝生长,是马铃薯抗晚疫病遗传工程所需要的核心元件。我们以烟草(NicotianatabacumXanxi-ncNN)基因组DNA为模板,通过合成5′-端及3′-端的一对特异引物,利用多聚酶链式反应(PCR)扩增得到了缺失3′-端CTPP的24kD蛋白基因,并克隆到E.coli质粒上。序列分析表明,我们得到的24kD蛋白基因由696个核苷酸组成,编吗232个氨基酸残基组成的多肽,包括5′-端25个氨基酸残基的信号肽,与国外报道的AP24蛋白基因序列一致。 The tobacco 24kDPR protein cleaves the sporangia of Phytophthora infestans and inhibits its mycelial growth, and is the core element required for the genetic engineering of late blight resistance in potato. Using Nicotiana tabacum Xanxi-ncNN genomic DNA as a template, a 24 kD protein lacking 3’-terminal CTPP was amplified by polymerase chain reaction (PCR) amplification by synthesizing a pair of specific primers at 5’-end and 3’-end Gene, and cloned into E. coli plasmid. Sequence analysis showed that the 24kD protein we obtained consisted of 696 nucleotides and encoded a polypeptide of 232 amino acid residues, including the signal peptide of 25 amino acid residues at the 5’-end. Compared with the reported AP24 protein gene The same sequence.
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