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目的建立定量分析葛根芩连汤含药血清中的多个有效成分的方法。方法采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用(UPLC-MS/MS)技术,色谱分离条件:Shim-pack XR-ODSⅢ(75 mm×2.0 mm,1.6μm)色谱柱,以5 mmol·L-1甲酸铵-0.1%甲酸(A)与乙腈(B)为流动相梯度洗脱,流速为0.2 m L·min-1,柱温为35℃;质谱条件:采用电喷雾(ESI)离子源,在正离子模式下对各化合物进行多反应监测模式(MRM)检测。结果含药血清中10个有效成分的线性关系良好(r>0.9900),日内精密度、日间精密度、稳定性的RSD值均小于15%,提取回收率、基质效应均符合方法学测定要求。结论本方法可快速、准确地同时检测大鼠血清中葛根芩连汤中10个有效成分的含量,为药理实验中葛根芩连汤含药血清提供质量控制方法。