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目的
为了研究人巨细胞病毒 (human cytomegalovirus,HCMV) 编码的miR-US33-1-5p生物学功能,通过实验室方法筛选和鉴定出miRNA-US33-1-5p作用的靶mRNA。
方法利用一种简单有效的hybrid-PCR实验方法筛选HCMV miRNA-US33-1-5p的候选靶mRNA。并通过双荧光素酶检测系统鉴定HCMV miRNA-US33-1-5p对这些候选靶mRNA 3′-UTR的调控作用。
结果通过hybrid-PCR实验方法获得了HCMV miRNA-US33-1-5p在感染的人胚肺细胞中的12个候选靶mRNA。并证实HCMV miR-US33-1-5p使其中7个候选靶mRNA 3′-UTR的荧光素酶质粒表达荧光素酶的能力显著下降。
结论鉴定的miR-US33-1-5p靶mRNA编码的蛋白质功能涉及病毒复制、免疫系统调节、蛋白质合成、细胞周期调节、能量代谢等。HCMV miR-US33-1-5p靶mRNA的鉴定为进一步研究HCMV miRNA-US33-1-5p的生物学功能提供实验资料。