RNA干扰抑制食管癌EC9706细胞中3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1基因的表达及其对肿瘤细胞恶性生物学行为的影响

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目的 研究RNA干扰抑制食管癌EC9706细胞中3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶 1(PDK1)的表达及其对肿瘤细胞恶性生物学行为的影响.方法 以PDK1 siRNA转染EC9706细胞,分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测PDK1 mRNA和蛋白的表达以及下游Akt蛋白的磷酸化水平.分别以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术、Transwell侵袭实验和裸鼠移植瘤实验检测PDK1 siRNA对EC9706细胞增殖、凋亡、侵袭以及体内抑瘤能力的影响.结果 与未转染组相比,PDK1 siRNA转染细胞后继续培养24、48和72 h时,PDK1 mRNA的表达均明显降低,抑制率分别为(28.5±4.2)%、(51.1±5.7)%和(60.6±4.1)%,PDK1蛋白和Akt蛋白的磷酸化水平也明显降低(P<0.05).PDK1 siRNA能有效抑制EC9706细胞的增殖、侵袭并促进细胞凋亡,且能抑制裸鼠移植瘤的生长并降低移植瘤组织中PDK1蛋白的表达.结论 PDK1可能与食管癌细胞的增殖、凋亡和侵袭等生物学行为密切相关,是肿瘤基因治疗的有效靶点.
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