论文部分内容阅读
目的建立稳定表达小鼠甘丙肽(GAL)的N.2a细胞株GAL—N.2a,探讨内源性过表达的甘丙肽对N-2a细胞增殖和凋亡的影响。方法脂质体法将重组载体PcDNA3.1-PDGF—GAL转染N-2a细胞,通过G418筛选获得稳定过表达GAL的细胞克隆,利用PCR、反转录PCR和Westernblot法检测细胞中GAL在N-2a细胞的过表达,通过MTr法检测N-2a细胞的增殖,借助流式细胞仪分别对过表达GAL的单克隆细胞进行细胞周期和细胞凋亡的检测。结果稳定转染N.2a细胞即GAL-N-2a实现GA£基因的高表