福氏志贺菌2a多药耐药基因marA的克隆及其原核表达

来源 :中国兽医科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：shall202

【摘要】

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根据福氏志贺菌2a多药耐药基因marA的序列，设计并合成了1对特异性引物，在引物的5′和3′端分别加入含有BamH Ⅰ和Sal Ⅰ限制性酶切位点的序列，以福氏志贺菌2a菌株基因组DNA为模

【作者】

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王松泰张继瑜魏小娟曹小安邱昌庆

【机构】

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中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所中国农业科学院新兽药工程重点开放实验室,甘肃农业大学动物医学院,中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室

【出处】

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中国兽医科学

【发表日期】

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2008年6期

【关键词】

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福氏志贺菌2a marA基因克隆原核表达 Shigella flexneri 2a marA gene cloning prokaryotic expres

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（30671582）

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根据福氏志贺菌2a多药耐药基因marA的序列，设计并合成了1对特异性引物，在引物的5′和3′端分别加入含有BamH Ⅰ和Sal Ⅰ限制性酶切位点的序列，以福氏志贺菌2a菌株基因组DNA为模板扩增了marA基因序列。将PCR产物与pMD18-T载体连接，转化到大肠杆菌DH5α。鉴定成功获得目的片段后，经BamH Ⅰ＋Sal Ⅰ双酶切并与载体pET-30a连接，构建原核表达质粒pET-30a-marA，并将其转化宿主菌BL21（DE3）pLys，用IPTG诱导其表达。SDS-PAGE分析表明，重组载体pET-

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