【摘 要】
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目的 对α-晶体蛋白与视网膜神经节细胞(RGCs)之间的作用进行定位研究.方法 原代培养RGCs,Thy1.1免疫荧光法鉴定RGCs并进行纯度检测,将α-晶体蛋白与RGCs共孵育,应用免疫细胞化学方法, 对α-晶体蛋白在RGCs上的靶分子进行间接免疫标记,再以光镜、激光共聚焦显微镜和电镜观察标记物,对α-晶体蛋白与RGCs的结合进行亚细胞定位.结果 Thy1.1鉴定RGCs纯度为90%～95%.R
【机 构】
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400038,重庆,第三军医大学附属西南医院眼科,400038,重庆,第三军医大学附属西南医院病理科,400038,重庆,第三军医大学附属西南医院眼科,400038,重庆,第三军医大学附属西南医院眼科
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目的 对α-晶体蛋白与视网膜神经节细胞(RGCs)之间的作用进行定位研究.方法 原代培养RGCs,Thy1.1免疫荧光法鉴定RGCs并进行纯度检测,将α-晶体蛋白与RGCs共孵育,应用免疫细胞化学方法, 对α-晶体蛋白在RGCs上的靶分子进行间接免疫标记,再以光镜、激光共聚焦显微镜和电镜观察标记物,对α-晶体蛋白与RGCs的结合进行亚细胞定位.结果 Thy1.1鉴定RGCs纯度为90%～95%.RGCs免疫组化染色结果显示,α-晶体蛋白与其靶分子结合复合物在RGCs膜上呈阳性表达;共聚焦显微镜下发现RGCs有免疫荧光复合物沉积,大量呈"戒指"状分布于细胞膜,少量分布于细胞轴突上.电镜结果显示,RGCs上有免疫复合物沉积,呈"线状"分布在细胞膜上,对照组呈阴性.结论 α-晶体蛋白能与RGCs发生结合,其作用靶点在RGCs膜上.α-晶体蛋白与RGCs的结合不是吸附作用,但是否为受体-配体性质的结合还需进一步验证。
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