【摘 要】
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目的:检测Lactotransferrin(LTF)基因在胃癌细胞株BGC823内的甲基化和表达情况,探讨LTF的DNA启动子区甲基化异常与其在胃癌内表达的相关性。方法:用亚硫酸氢盐测序PCR方法(BS
【机 构】
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温州医科大学附属第一医院消化内科,温州医科大学仁济学院,
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目的:检测Lactotransferrin(LTF)基因在胃癌细胞株BGC823内的甲基化和表达情况,探讨LTF的DNA启动子区甲基化异常与其在胃癌内表达的相关性。方法:用亚硫酸氢盐测序PCR方法(BSP)检测BGC823启动子区甲基化状态,使用real-time PCR和Western blot法分别检测LTF基因在BGC823内的mRNA和蛋白表达水平。同时使用去甲基化剂5-aza-CdR处理胃癌细胞株,观察给药前后的DNA甲基化状态和mRNA表达情况。结果:BGC823启动子甲基化率达53.6%,使用5-aza-CdR后,药物处理的两组(药物浓度2μmol/L组和药物浓度10μmol/L组)和对照组甲基化率差异和LTF的mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05),并且随着BGC823启动子甲基化程度的下降,其mRNA和蛋白表达增加。而药物处理组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LTF基因在胃癌细胞株BGC823内表现为较高甲基化状态,而且LTF的表达和其启动子区甲基化情况相关,使用去甲基化剂能逆转DNA的甲基化情况从而使其mRNA重新表达。
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