【摘 要】
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为了解隐孢子虫在藏羊中的感染情况,采用饱和蔗糖漂浮法检查34份藏羊新鲜粪便.通过巢式PCR扩增阳性分离株的18S rRNA、HSP70和CpA135位点基因,并采用限制性内切酶SspⅠ和Vsp
【机 构】
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四川农业大学动物医学院,动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014成都动物园,成都,610014;
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为了解隐孢子虫在藏羊中的感染情况,采用饱和蔗糖漂浮法检查34份藏羊新鲜粪便.通过巢式PCR扩增阳性分离株的18S rRNA、HSP70和CpA135位点基因,并采用限制性内切酶SspⅠ和VspⅠ对18S rRNA产物进行酶切分析.同时构建系统发育树,分析藏羊感染隐孢子虫类别.结果显示仅1只藏羊感染隐孢子虫,18S rRNA与Cryptosporidium xiaoi山羊分离株(GU553016)相似率为99.9％;HSP70与C.xiaoi绵羊分离株(FJ896041)相似率为98.7％;CpA135与C.ubiquitum人源分离株(HM358023)相似率为99.3％.18S rRNA产物经SspⅠ酶切后获得3条条带493 bp、262 bp和103 bp,经VspⅠ酶切后获得3条条带508 bp、181 bp和104 bp,与C.bovis酶切条带相似.基于18S rRNA和HSP70的系统发育分析显示,该分离株与C.xiaoi亲缘性最近.这是首次在藏羊体内发现肖氏隐孢子虫.
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