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为建立猪瘟制品中牛病毒性腹泻病毒（BVDV）污染的诊断方法，本研究根据GenBank公布的BVDV全基因组序列，选择BVDV保守性比较高的5′非编码区，利用Olig06．0软件设计了2对特异性引物，建立了检测BVDV的套式RT-PCR方法。该方法极大提高了常规RT-PCR检测方法的特异性和敏感性，重复性好、特异性强、敏感性高，可以准确快速检测出极低含量的BVDV，为动物与疫苗生物制品原辅料中BVDV的快速低含量检测提供了一种简单、特异、敏感、快速的检测方法。